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植物蔗糖含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC2465
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
試劑一：臨用前加1mL蒸餾水溶解,，用水稀釋10倍,，備用，即1mg/mL,。
產(chǎn)品說明：
蔗糖是植物光合作用的主要產(chǎn)物,，也是糖分運(yùn)輸和儲藏的主要形式。因此,，測定蔗糖含量對于植物糖代謝具有重要意義,。此外，蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜,、果脯﹑糖果和乳制品等產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一,。先用堿與樣本共熱，破壞其中的還原糖,。然后在酸性條件下將蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,，果糖進(jìn)一步與間*二酚反應(yīng),，生成有色物質(zhì)，在480nm 下有特征吸收峰,。
技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0316 mg/mL
線性范圍：0.039-12 mg/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板,、研缽/勻漿器,、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一,、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
稱取0.1g 樣本，常溫研碎,，加入0.5mL 提取液,，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到離心管中，置于80℃水浴鍋中10min,，振蕩3~5 次,，冷卻后，4000g,，25℃離心10min,，取上清，加入2mg試劑五,，80℃脫色30min,，再加入0.5mL 提取液，4000g,，25℃離心10min,，取上清液測定。
二,、測定步驟

1. 可見分光光度/酶標(biāo)儀計預(yù)熱30min 以上,，調(diào)節(jié)波長至480nm，蒸餾水調(diào)零,。

2. 樣本測定（在1.5mL EP管中依次加入下列試劑）：

混勻,，沸水浴10min左右,，冷卻后取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中測定480nm 處的吸光值，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管分別記為A1,、A2 和A3,。
三、蔗糖含量計算
1,、按照樣本蛋白濃度計算
蔗糖含量（mg/mg prot）= (C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr
此法需要自行測定蛋白濃度,。
2、按照樣本質(zhì)量計算
蔗糖含量(mg/g 質(zhì)量）=(C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
    C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度,，1mg/mL,；V1：加入樣本體積，0.025mL,；V2：加入提取液體積，1mL,； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本質(zhì)量,，g,。
注意事項(xiàng)：
當(dāng)樣本吸光值大于1.4時，建議將樣本用提取液稀釋后進(jìn)行測定,。
參考文獻(xiàn)：
[1] Fils-Lycaon B, Julianus P, Chillet M, et al. Acid invertase as a serious candidate to control the balance sucrose versus (glucose+ fructose) of banana fruit during ripening[J]. Scientia horticulturae, 2011, 129(2): 197-206.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0580/BC0585 蔗糖合成酶（SS）活性檢測試劑盒
BC0600/BC0605 蔗糖磷酸合成酶（SPS）活性檢測試劑盒

植物蔗糖含量檢測試劑盒 微量法 植物蔗糖含量檢測試劑盒 微量法