目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學(xué)>>DNA電泳>> G7140DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料
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更新時(shí)間:2024-07-29 13:25:39瀏覽次數(shù):1903評(píng)價(jià)
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貨號(hào) :G7140
規(guī)格:0.5ml (10000×)
保存:常溫運(yùn)輸,4℃保存,,有效期一年,。
注意 :本產(chǎn)品屬于微量核酸檢測(cè)試劑,使用時(shí)請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)操作,。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介 :
目前常見(jiàn)的替代 EB 的核酸染料 SYBR Green I (屬于花氰類染料) 雖然毒性比 EB 低,、 靈敏度比 EB 高,,但由于其化學(xué)穩(wěn)定性差;此外,,SYBR Green I 在電泳過(guò)程中能在 DNA 分子間移位,,很容易使 DNA 條帶模糊和扭曲,電泳清晰度和分辨率下降,。所以在實(shí)際應(yīng)用中依然不能有效替代 EB,。本產(chǎn)品是同時(shí)具有 EB 穩(wěn)定性和 SYBR Green I 低毒性的新性核酸染料,其特點(diǎn)如下:
1. 低毒,。其主要成分未發(fā)現(xiàn)對(duì)人體有致癌性,、未被列入有毒有害品,有利于保護(hù)使用者的健康和保護(hù)日益惡化的環(huán)境,。
2. 靈敏,。檢測(cè)靈敏度跟 EB 相當(dāng),能滿足常規(guī)核酸電泳實(shí)驗(yàn)要求,。
3. 穩(wěn)定,。對(duì)光、水和熱的穩(wěn)定性跟 EB 相當(dāng),,可加入瓊脂糖凝膠中反復(fù)熔化,。
4. 無(wú)分子間位移現(xiàn)象,。不會(huì)出現(xiàn) SYBR 染料常見(jiàn)的條帶模糊和扭曲現(xiàn)象,。
5. 使用方法多樣。既可以加入熔化的膠中,,也可以電泳后染色,,還可用于 PAGE。
6. 跟各種常用的核酸電泳緩沖液(如 SuperBuffer-2,、TBE,、TAE)兼容,但在 SuperBuffer-2 和 TBE 中背景低,。
7. 觀察時(shí)不需要任何額外的儀器設(shè)備或 UV 光源,,可以使用現(xiàn)成的觀察 EB 的 300nm UV。
8. 可用于 RNA 染色(也呈綠色),。
9. DNA 或 RNA 濃度較高時(shí)還可以直接在日光下觀察 (需要將膠放在黑色背景下) ,。 由于避免了 UV 對(duì) DNA的傷害,尤其適用于膠回收實(shí)驗(yàn),。
使用方法:
電泳中染色:
本方法是將 DNAGREEN 直接加入溶化的凝膠中使用,,只適用于瓊脂糖凝膠電泳,不適用于 PAGE,。
1. 將 DNAGREEN 直接加入到融化的瓊脂糖凝膠中,, 每 100mL 凝膠加 310 uL DNAGREEN,, 混合均勻后倒膠。瓊脂糖凝膠中不能含任何其他染料(如 EB 和 SYBR Green I,,否則會(huì)相互干擾) ,。在 100mL 瓊脂糖凝膠中加入 DNAGREEN 的量不要超過(guò) 10 uL,否則背景增強(qiáng),。注意:一定要保證瓊脂糖*熔化,,尤其是在*次熔化膠的時(shí)候,否則未熔化的小顆粒將產(chǎn)生跟染料相同的熒光,。
2. 將 DNA 樣品與 DNA 上樣液按比例混合后上樣,。注意:一定要使用不含 SDS 等去污劑的上樣液,否則SDS 會(huì)跟染料結(jié)合,,極大地降低靈敏度,。
3. 上樣后電泳,電泳參數(shù)同常規(guī)的電泳,。
4. 電泳結(jié)束后在 300 nm 左右 的 UV 下觀察,。
注意:不要使用波長(zhǎng)為 260 nm 或 360 nm 的 UV,否則檢測(cè)靈敏度會(huì)降低,。如果 DNA 或 RNA 濃度較高,,還可以直接在日光下直接觀察(需要將膠放在黑色背景下) ,
避免 UV 對(duì) DNA 的傷害,,尤其適用于膠回收實(shí)驗(yàn),。
5. 用配置了 520-550 nm 濾光片(一般呈黃色或深黃色)的相機(jī)拍照。注意:不要使用與 EB 兼容的紅色濾光片(它能阻擋 520-550 nm 的光) ,。如果能再加上能濾去 UV 的濾光片,,效果會(huì)更好。
6. 后續(xù) Southern,、轉(zhuǎn)膜或 DNA 膠回收實(shí)驗(yàn)按常規(guī)操作進(jìn)行,。
電泳后染色:
本方法是在電泳后對(duì) DNA 進(jìn)行染色,適用于瓊脂糖凝膠電泳和 PAGE,。但該方法需要單獨(dú)的染色處理,,染料用量較大,不推薦用于瓊脂糖凝膠的染色,。
1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳,。
2. 用去離子水將 DNAGREEN 稀釋 500 倍后(100 mL 水需要加 0.2 mL DNAGREEN) ,將凝膠放入,,室溫下?lián)u晃染色 30 分鐘(對(duì)瓊脂糖凝膠)或 15 分鐘(對(duì) PAGE) ,。
3. 用水脫色 10-30 分鐘,具體時(shí)間需根據(jù)背景強(qiáng)弱決定。
注意:電泳后染色液可以反復(fù)使用次數(shù),。
疑難解答:
Q:本產(chǎn)品可否用于 RNA 染色,?
A: 可以,不論 RNA 是在甲醛變性膠中電泳,,還是在普通的 SuperBuffer-2,、TBE 或 TAE 膠中電泳,RNA染色后在 300nm 下都跟 DNA 一樣呈綠色,,
Q:本產(chǎn)品是否可以加入上樣液中進(jìn)行染色,?
A:不行,本產(chǎn)品只能直接加入凝膠中進(jìn)行染色或電泳后再染色,。
Q:為何前端(靠近正極)的 DNA 條帶很淡或根本看不見(jiàn),?
A:跟 EB 一樣,,電泳時(shí) DNAGREEN 朝負(fù)極方向移動(dòng),,當(dāng)前端的 DNA(小片段)進(jìn)入沒(méi)有 DNAGREEN的區(qū)域時(shí),已經(jīng)結(jié)合的染料分子會(huì)逐漸從 DNA 分子上脫落,,所以條帶會(huì)變淡或根本看不見(jiàn),。解決辦法之一是縮短電泳時(shí)間或電泳后再染色,;之二是在每 100 mL 電泳緩沖液中補(bǔ)加 3-5uL 染料。
Q:本產(chǎn)品在哪種緩沖液中效果好,?
A:DNAGREEN 染料在不同緩沖液中背景熒光強(qiáng)度不同,,從弱到強(qiáng)的順序是:SuperBuffer-2、TBE,、TAE,。
在背景較強(qiáng)的緩沖液體中,可以適當(dāng)降低染料的用量,,比如 100mL 膠中加 3-5 uL,。濃度需要稍做摸索,。
Q:用 SYBR 染色的 DNA 在電泳時(shí)為何容易發(fā)生條帶模糊和扭曲現(xiàn)象,?
A:SYBR 染料一般與 DNA 的小溝結(jié)合,但在常規(guī)電泳條件下該結(jié)合并不牢固,,染料分子可以在標(biāo)記的和未
標(biāo)記的 DNA 分子之間轉(zhuǎn)移,,使 DNA 分子的泳動(dòng)速度時(shí)快(無(wú)染料結(jié)合時(shí))時(shí)慢(有染料結(jié)合時(shí)) ,發(fā)生條帶模糊和扭曲現(xiàn)象,。嵌入型染料(如 EB 和本產(chǎn)品)與 DNA 結(jié)合牢固,,則無(wú)此現(xiàn)象。
相關(guān)產(chǎn)品 :
T1050 5×TBE 緩沖液
T1060 50×TAE 緩沖液
E1020 EB 溶液 (10mg/ml)
A1020 40% 丙烯酰胺( 19:1 )
D1010 6×DNA Lodding Buffer
M1060 D2000 DNA Ladder
PC1120 2×Taq PCR MasterMix ( 含染料)
DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料訂購(gòu)說(shuō)明:
1,、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2,、部分非常用產(chǎn)品,,需提前1-2日預(yù)訂,,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3,、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn),。
4,、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨,。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,,將收據(jù),、底單等連同收貨人的地址、姓名,、等以傳真,、、短信,、等形式通知我們,。
DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料運(yùn)輸說(shuō)明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,,放入索萊寶的箱子,,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2,、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸,。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),再使用泡沫盒密封,,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,,安全快速高效放心的送客戶的手中,,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3,、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝,。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中,。
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