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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50ul |
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貨號 | SR4110 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | SYBR Green I 染料是一種直接與雙鏈 DNA (dsDNA) 結合的熒 |
PCR試劑 SYBR Green I核酸染料(PCR級,10000X)
貨號:SR4110
規(guī)格:50/100ul
保存:-20℃避光保存,,有效期少一年,。
產(chǎn)品說明 :
SYBR Green I 染料是一種直接與雙鏈 DNA (dsDNA) 結合的熒光染料,是熒光定量 PCR 常用的 DNA結合染料,。在定量 PCR 中,,SYBR Green I 可與雙鏈 DNA(dsDNA)非特異性結合后發(fā)出熒光,,則可以通過檢測反應體系中的 SYBR Green I 熒光強度,達到檢測 PCR 產(chǎn)物擴增量的目的,。游離狀態(tài)下,,SYBR Green I 發(fā)出微弱的熒光,一旦與 dsDNA 結合,,其熒光增加 1000 倍,,一個反應發(fā)出的全部熒光信號與出現(xiàn)的 dsDNA 量成比例,且會隨擴增產(chǎn)物的增加而增加,;所以通過檢測 PCR 反應液中的熒光信號強度,,可以對目的基因進行準確定量,同時還可以測定擴增的目的 DNA 段的熔解溫度,。
使用說明 :
使用時,,配置PCR反應混合液, 將10000×SYBR Green I濃縮液加入到PCR反應體系,, 使終濃度為0.5× (0.2×到 1×之間調(diào)整) ,。以上操作建議在冰上進行。
注: ① 反應液配制方法和 PCR 擴增條件請參照 DNA 聚合酶使用說明,。
② Realtime PCR 擴增儀的使用方法,,請參照各儀器說明書。
注意事項 :
使用濃度對熒光 PCR 結果的影響
SYBR Green I 的使用濃度是保證熒光定量 PCR 實驗成功非常關鍵的因素,。如果 SYBR Green I 的濃度過低會使熒光信號的變化降低,,這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出;而在高濃度時,,將會抑制 PCR 反應,,降低PCR 反應效率。所以一般在使用 SYBR Green I 時應根據(jù)實際情況優(yōu)化使用濃度,,反應的終濃度為 0.2×到 1×之間,。
鎂離子濃度的影響
提高鎂離子濃度可以降低SYBR Green I對PCR反應的抑制作用。 我們建議在用SYBR Green I進行熒光PCR反應時,,鎂離子濃度比無 SYBR Green I 的普通 PCR 反應高出 0.5~3mM,。
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參考文獻:
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《Collagen facilitates the colorectal cancer stemness and metastasis through an integrin/PI3K/AKT/Snail signaling pathway》 作者:Xiangbin Wu,Jianhui Cai,,Zhigui Zuo,,Jinlei Li 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.743 PMID:30913493
《MMP-9 secreted by tumor associated macrophages promoted gastric cancer metastasis through a PI3K/AKT/Snail pathway》 作者:Liu Lin,Yu Ye,,Xiumei Zhu 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.743 PMID:31202170