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更新時(shí)間：2024-07-29 10:09:28瀏覽次數(shù)：2132評(píng)價(jià)
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| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
| 貨號(hào) | BC1525 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
| 主要用途 | 測定意義：氮素是構(gòu)成生物體的一種必需元素,自然界中的氮素循環(huán)包括許多轉(zhuǎn)化作用,。空 |
植物氨態(tài)氮含量
檢測試劑盒說明書
微量法
貨號(hào)：BC1525
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 提取液 | 液體120 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 液體22 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑一：臨用前將試劑三倒入使其充分溶解備用,。該試劑溶解后10天內(nèi)有效,。
試劑二：臨用前加1 mL蒸餾水充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg半胱*酸,，臨用前加入1.157 mL提取液,，得到1000 μg/mL氮標(biāo)準(zhǔn)液。
產(chǎn)品說明：
氮素是構(gòu)成生物體的一種必需元素,。氨態(tài)氮進(jìn)入植物細(xì)胞后形成氨基酸或酰胺,，植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。
氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng),，產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物,，在570nm有特征吸收峰,；通過測定570nm吸光度，來計(jì)算氨基酸含量,。
技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：24.2 μg/mL
線性范圍：25-400 μg/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋,、微量玻璃比色皿/96孔板,、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器,、無水乙醇,、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一,、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液,，室溫勻漿后于25℃,，12000g離心10min，取上清待測,。
二,、測定步驟
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至570nm,，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零,。
將1000μg/mL氮標(biāo)準(zhǔn)液用提取液分別稀釋為400、300,、200,、100、50,、25 μg/mL,。
操作表：
| 試劑名稱（μL） | 測定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
| 樣本 | 15 | - | - |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | - | 15 | - |
| 提取液 | - | - | 15 |
| 試劑一 | 150 | 150 | 150 |
| 無水乙醇 | 150 | 150 | 150 |
| 試劑二 | 15 | 15 | 15 |
充分混勻后蓋緊瓶蓋封口膜封口（防止水分散失），置于沸水浴中保溫10min,，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,，將測定管8000rpm離心5min后取上清，吸取200μL于微量玻璃比色皿或者96孔板中,，于570nm測定吸光值,。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。計(jì)算ΔA=A測定管-A空白管,，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管,。
三,、植物氨態(tài)氮含量計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：
以各個(gè)氮標(biāo)準(zhǔn)液為橫坐標(biāo)，其對(duì)應(yīng)的ΔA標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo),，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b，將ΔA帶入方程中,，得到x (μg/mL),。
NH3-N含量的計(jì)算：
（1）按樣本質(zhì)量計(jì)算：NH3-N含量（μg/g 質(zhì)量）=x×V提取÷W=x÷W
（2）按蛋白濃度計(jì)算：NH3-N含量（μg/mg prot）=x×V提取÷（Cpr×V提取）=x÷Cpr
W：樣本質(zhì)量,，g,；Cpr：蛋白濃度，mg/mL,；V提?。簶颖咎崛∫嚎傮w積，1mL,。
注意事項(xiàng)：
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定,。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：
[1] Fuyuan Zhu,Moxian Chen,Wailung Chan,et al. SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses. Journal of Proteomics. September 2018; (IF3.537)
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0080/BC0085 硝酸還原酶（NR）活性檢測試劑盒
BC1450/BC1455 谷*酰胺酶（GLS）活性檢測試劑盒
BC1460/BC1465 谷*酸脫氫酶（GDH）活性檢測試劑盒
植物氨態(tài)氮檢測試劑盒 微量法 植物氨態(tài)氮檢測試劑盒 微量法
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