目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC2045-100T/48Sβ-淀粉*活性檢測(cè)試劑盒 微量法
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更新時(shí)間：2024-07-28 15:31:26瀏覽次數(shù)：1678評(píng)價(jià)
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| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
| 貨號(hào) | BC2045 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
| 主要用途 | 測(cè)定意義：淀粉*責(zé)水解淀粉,主要包括α-淀粉*和β-淀粉*,。β-淀粉*(EC |
β-淀粉*（
β-AL）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書（DNS顯色法）
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作,。
貨號(hào)：BC2045
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體35 mL×1瓶 | 常溫保存 |
| 試劑二 | 液體10 mL×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 粉劑×2支 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑一：若有黃色晶體析出,，需加熱溶解后再用,；
試劑二：臨用前取取1支試劑三加入到1瓶試劑二中，置于常溫水中并加熱至煮沸,，期間不斷攪拌粉劑至溶解,，用不完的試劑2-8℃保存4周；
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg無(wú)水*萄糖,。臨用前加入1 mL蒸餾水配制成10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,，2-8℃保存兩周。
產(chǎn)品說(shuō)明：
淀粉*負(fù)責(zé)水解淀粉,，主要包括α-淀粉*和β-淀粉*,。β-淀粉*(EC 3.2.1.2) 從淀粉的非還原端切開α-1,4糖苷鍵，生成葡萄糖,、麥芽糖,、麥芽三糖、糊精等還原糖,。
還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì),。α-淀粉*不耐酸，β-淀粉*不耐熱,。根據(jù)上述特性,，鈍化其中之一，就可測(cè)出另一種淀粉*的活力,。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、水浴鍋,、離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、96孔板/微量玻璃比色皿,、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
稱取約0.1g樣本,，加入0.8mL蒸餾水，研磨勻漿,；將勻漿倒入離心管中,，提取液在室溫下放置提取15min，每5min振蕩1次,，使其充分提?。?span style="font-family: Times New Roman, Times, serif">6000g,，常溫離心10min,，取上清液加蒸餾水定容至10mL，搖勻,，即淀粉*原液,。
吸取上述淀粉*原液1mL，加入4mL蒸餾水,，搖勻,，即為淀粉*稀釋液，用于（α+β）淀粉*總活力的測(cè)定,。
二,、測(cè)定步驟
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到540nm,，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零,。
標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋：將10mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋為0.5、0.25,、0.125,、0.0625、0.03125,、0.015625,、0.0078 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表：
| 序號(hào) | 稀釋前濃度（mg/mL） | 標(biāo)準(zhǔn)液體積（µL） | 蒸餾水體積（µL） | 稀釋后濃度（mg/mL） |
| 1 | 10 | 50 | 950 | 0.5 |
| 2 | 0.5 | 200 | 200 | 0.25 |
| 3 | 0.25 | 200 | 200 | 0.125 |
| 4 | 0.125 | 200 | 200 | 0.0625 |
| 5 | 0.0625 | 200 | 200 | 0.03125 |
| 6 | 0.03125 | 200 | 200 | 0.015625 |
| 7 | 0.015625 | 200 | 200 | 0.0078 |
備注：實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需75µL標(biāo)準(zhǔn)溶液,。
取2支EP管分別加入75μL淀粉*原液和淀粉*稀釋液,，沸水浴5min，分別作為α-淀粉*對(duì)照管和總淀粉*對(duì)照管使用,。
測(cè)定操作表：
| 試劑名稱（μL） | α淀粉*活力測(cè)定 | 總淀粉*活力測(cè)定 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定 | |||||||||
| 對(duì)照管 | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | |||||||
| 淀粉*原液 | 75（煮沸） | 75 | - | - | - | - | ||||||
| 蒸餾水 | - | - | - | - | - | 75 | ||||||
| 標(biāo)準(zhǔn)溶液 | - | - | - | - | 75 | - | ||||||
| 置于70℃水浴鍋中準(zhǔn)確反應(yīng)15min,，冷卻至室溫 | ||||||||||||
| 淀粉*稀釋液 | - | - | 75（煮沸） | 75 | - | - | ||||||
| 試劑二 | - | 75 | - | 75 | - | - | ||||||
| 置于40℃水浴鍋中準(zhǔn)確保溫5min | ||||||||||||
| 試劑一 | 150 | 150 | 150 | 150 | 150 | 150 | ||||||
| 試劑二 | 75 | - | 75 | - | 75 | 75 | ||||||
混勻，沸水浴10min,，取200μL至96孔板或微量玻璃比色皿中,，在540nm下測(cè)定吸光度,，從左到右分別記為A1、A2,、A3,、A4、A5和A6,，計(jì)算ΔAα=A2-A1,，ΔA總=A4-A3，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A5-A6,。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管,。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)1-2次。
注意事項(xiàng)：
測(cè)定的吸光值大于1.5時(shí),，可以對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后測(cè)定。若吸光值過(guò)小,，可以濃縮淀粉*稀釋液或者淀粉*原液,。
參考文獻(xiàn)：
[1] Dziedzoave N T, Graffham A J, Westby A, et al. Influence of variety and growth environment on β-amylase activity of flour from sweet potato (Ipomea batatas)[J]. Food control, 2010, 21(2): 162-165.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0700/BC0705 淀粉含量檢測(cè)試劑盒
BC0610/BC0615 α-淀粉*（α-AL）活性檢測(cè)試劑盒
BC0430/BC0435 ADPG焦磷酸化酶（AGP）活性檢測(cè)試劑盒
β-淀粉*活性檢測(cè)試劑盒 微量法 β-淀粉*活性檢測(cè)試劑盒 微量法
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