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腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的影響因素和質(zhì)量控制
㈠ 分析前
1. 標(biāo)本的采集,。血液標(biāo)本的正確采集和保存是腫瘤標(biāo)志物測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確的重要保證。如前列腺按摩,、前列腺穿刺,、射精、 導(dǎo)尿和直腸鏡檢查后,，血液 PSA 和PAP 值可升高,；肝、腎功能異常和膽道排泄不暢,、膽汁淤滯等均可造成腫瘤標(biāo)志物如 CEA ,、 ALP 、 GGT ,、細(xì)胞因子等濃度增高；某些藥物會(huì)影響腫瘤標(biāo)志物的濃度,，如抗雄激素治療前列腺癌時(shí)可抑制 PSA 產(chǎn)生,，導(dǎo)致PSA假陰性結(jié)果； 唾液和汗液污染標(biāo)本可使SCC 升高,。
由于紅細(xì)胞和血小板中也存在神經(jīng)元特異性烯醇化酶（ NSE ）,，因此，樣本溶血可使血液中 NSE 濃度 增高,。試管內(nèi)的促凝劑,，對(duì)某些項(xiàng)目的測(cè)定有干擾。
2. 標(biāo)本的保存,。血液標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)離心,，保存 於 4 ℃ 冰箱中， 24 小時(shí)內(nèi)測(cè)定,；如在短期內(nèi)測(cè)定,，則應(yīng) -20 ℃ 保存，長(zhǎng)期保存應(yīng)置-70 ℃ 冰箱 , 標(biāo)本應(yīng)防止反復(fù)凍融,。酶類(lèi)和激素類(lèi)腫瘤標(biāo)志物不穩(wěn)定,，易降解，應(yīng)及時(shí)測(cè)定或低溫保存。
㈡ 分析中
1. 測(cè)定方法和試劑對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響：
從方法學(xué)來(lái)看,，腫瘤標(biāo)志物測(cè)定方法很多,，有放射免疫測(cè)定法，酶聯(lián)免疫測(cè)定法,，化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法等,，每種測(cè)定方法有自己的精密度和重復(fù)性，但手工操作的方法重復(fù)性較差,，誤差比較大,，操作時(shí)要特別認(rèn)真；用自動(dòng)化儀器進(jìn)行測(cè)定,，重復(fù)性好,，誤差小。

不同的試劑盒測(cè)定也有差異 ,其原因可能是由于使用的單克隆抗體針對(duì)抗原的位點(diǎn)不同所致,。有時(shí)即使使用同一抗體,，也可能因抗原異質(zhì)性（如原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移后，失去了原有的抗原性而停止分泌原有的腫瘤抗原）或基質(zhì)的影響而得到不同的結(jié)果,。有研究報(bào)道,，使用12 種不同的 CEA 試劑盒檢測(cè)某一混合血清中 CEA 的濃度，結(jié)果其差異超過(guò) 100%,。導(dǎo)致分析間誤差的主要原因是沒(méi)有測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化,，包括缺乏統(tǒng)一的抗原、抗原成分,、校和參考方法等,。因此，在工作中要盡量使用同一種方法,，同一種儀器和同一廠(chǎng)家的試劑盒進(jìn)行測(cè)定,。

2. “鉤狀效應(yīng)”對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響： 腫瘤標(biāo)志物的范圍常涵蓋幾個(gè)數(shù)量級(jí)，“鉤狀效應(yīng)”可將高濃度結(jié)果錯(cuò)誤報(bào)告為低濃度,。酶聯(lián)免疫測(cè)定或免疫放射測(cè)定時(shí),，若待測(cè)樣本中抗原濃度過(guò)高，會(huì)出現(xiàn)高濃度后帶現(xiàn)象,，即“鉤狀效應(yīng)”（ hook effect）,，此時(shí)免疫反應(yīng)被明顯抑制，出現(xiàn)錯(cuò)誤的低值,，要消除這種干擾,，只有對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重新測(cè)定。
3. 交叉污染對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響： 當(dāng)測(cè)定很高濃度的標(biāo)本時(shí),，交叉污染成為一個(gè)導(dǎo)致假陽(yáng)性的潛在問(wèn)題,，所以應(yīng)不時(shí)地復(fù)查有無(wú)標(biāo)本被交叉污染,。
4.嗜異性抗體對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響： 大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定中常使用一對(duì)鼠單克隆抗體來(lái)與腫瘤抗原反應(yīng)，如果病人血清中存在嗜異性抗體（特別是人抗鼠抗體）,，它可能在兩種鼠單克隆抗體間起“橋梁”作用,，導(dǎo)致在無(wú)抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤標(biāo)志物濃度增高的假象,。避免的辦法是在樣本中先加入提純的鼠 IgG,，經(jīng)溫育后，再用 PEG 沉淀鼠 IgG 和人抗鼠 IgG復(fù)合物,，然后再進(jìn)行測(cè)定,。嗜異性抗體可出現(xiàn)在曾被鼠或?qū)櫸镆н^(guò)的人，以及使用過(guò)動(dòng)物免疫劑（如單克隆抗體）治療過(guò)的人,。
5 腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的質(zhì)量控制
⑴ 檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性要求：常規(guī)腫瘤標(biāo)志物測(cè)定的變異系數(shù),，批內(nèi) CV<5% ， 批間 CV<10% （ 期望值 ） ,。
⑵ 室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本的要求：室內(nèi)質(zhì)控應(yīng)包括陰性和陽(yáng)性低值和高值質(zhì)控血清,，要能涵蓋腫瘤標(biāo)志物測(cè)定的范圍 。
⑶ 室內(nèi)質(zhì)控品要求：以血清為基質(zhì),。
⑷ 室內(nèi)質(zhì)控圖：腫瘤標(biāo)志物很少有參考方法,，要堅(jiān)持作室內(nèi)質(zhì)控圖，以均值為靶值,，來(lái)判斷試驗(yàn)的穩(wěn)定性和重復(fù)性,。
㈢ 分析后：
1 ．參考值范圍， 不同標(biāo)本如血液,、尿液,、胸、腹水等,，必須有不同的參考值。不同地區(qū),、不同人群,、不同方法、不同試劑和設(shè)備應(yīng)建立自己的參考值范圍,。
2 ．病人基礎(chǔ) 測(cè)定 值的變化,， 對(duì)于結(jié)果的 分析極 有價(jià)值。故應(yīng)監(jiān)測(cè)病人治療前,、治療中和治療后各個(gè)階段腫瘤標(biāo)志物含量 的變化,，好畫(huà)一張腫瘤標(biāo)志物含量的變化的曲線(xiàn)圖，以便綜合分析,。
3 ．上升或下降 25 ％的臨床意義,，一般病人的結(jié)果在排除檢測(cè)方法引起的誤差后,，上升或下降 25 ％都有臨床價(jià)值。對(duì)于測(cè)定結(jié)果升高的標(biāo)本必須復(fù)查,，以防測(cè)定誤差,。
4 ．加強(qiáng)與臨床的交流和溝通， 由于 腫瘤標(biāo)志物測(cè)定其臨床意義的特殊性,，必須加強(qiáng)與臨床的交流和溝通,，當(dāng)改變腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)方法和試劑時(shí)，必須通知臨床,，否則會(huì)影響結(jié)果的判斷,。建議醫(yī)師開(kāi)化驗(yàn)單時(shí)提供簡(jiǎn)短的病人信息，如“手術(shù)后 ”“化療 3 次后 ” 等,，這對(duì)解釋結(jié)果非常重要,，還可幫助我們發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的偶然差錯(cuò)。
5 ．必須知道腫瘤標(biāo)志物的半壽期,， 這有助解釋某些腫瘤標(biāo)志物,，如 AFP 和 hCG 的濃度變化，對(duì)于臨床判斷療效有重要意義,。