人補體蛋白3（C3）酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用說明書
本試劑盒僅供體外研究使用!
預期應用
ELISA法定量測定人血清,、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中C3含量,。
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,，制成固相載體，往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標本或標準品,、生物素化的抗C3抗體,、HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，計算樣品濃度。
操作步驟
實驗開始前,，各試劑均應平衡室溫（試劑不能直接在37℃溶解）,；試劑或樣品稀釋時，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時,，應對樣品進行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣：分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，酶標板加上蓋或覆膜,，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2. 棄去液體，甩干,，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘,，大約400μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl,，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘,，350μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）,。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應,，此時藍色立轉黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液,。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）,。 在加終止液后立即進行檢測。
本公司長期經(jīng)營ELISA試劑盒,、細胞、酶,、血清,、抗體、金標試劑盒,、生物試劑、標準品,、儀器,、耗材、培養(yǎng)基等生物化學試劑,。價格實惠,，質(zhì)量有保證?？蛻艨梢酝ㄟ^、傳真,、、網(wǎng)絡訂購,。
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