小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制:
試劑盒成份 96孔配置 48孔配置
96/48人份酶標(biāo)板 1塊板(96T) 半塊板(48T)
塑料膜板蓋 1塊 半塊
標(biāo)準(zhǔn)品:240ng/ml 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml)
空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml)
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml)
生物素標(biāo)記的抗HYD抗體 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml)
親和鏈酶素-HRP 1瓶(12ml) 1瓶(5ml)
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml)
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)
小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒試驗原理:
HYD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知HYD濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將HYD和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育,。洗滌后,,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A、B,,和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HYD的濃度呈比例關(guān)系,。
自備材料:
1. 蒸餾水,。
2. 加樣器:5ul、10ul,、50ul,、100ul、200ul,、500ul,、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等,。
小鼠氫化可的松ELISA檢測試劑盒樣品收集,、處理及保存方法:
1、 血清……操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2,、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3,、 細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,,取上清液。
5,、 保存……如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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