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層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度,,樣品用量大,,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,,直徑大于2厘米,,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外,, 直徑加大,,洗脫液體體積增大,,樣品稀釋度大,。分離度取決于柱高,為分離不同組分,,凝膠柱床必須有適宜的高度,,分離度與柱高的平方根相關(guān),但由于軟凝膠柱過(guò)高擠壓變形阻塞,,一般不超過(guò)1米,。分族分離時(shí)用短柱,一般凝膠柱長(zhǎng)20-30厘米,柱高與直徑的比較5:1─10:1,,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍,。 分級(jí)分離時(shí)柱高與直徑之線為20:1─100:1,常用凝膠柱有50×25厘米,,10×25厘米,。層析柱濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,如果支掌濾板下的死體積大,,被分離組分之間重新混合的可能性就大,,其結(jié)果是影響洗脫峰形,出現(xiàn)拖尾出象,,降低分辯力,。在分離時(shí),死體積不能超過(guò)總床體積的1/1000,。
文章關(guān)鍵詞:層析柱
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