基因槍微彈的制備：
1,、EP管稱取60 mg （或3mg）金粉,；
2,、加入1ml （或50ul）無(wú)水乙醇,，振蕩1min,10000rpm離心10S,；
3、棄上清，加入1ml（或50ul） 無(wú)菌水洗,，振蕩1min,10000rpm離心10S,；
4、棄上清,，加入1ml（或50ul） 無(wú)菌水洗,，振蕩1min, -20℃；
DNA的包裹
1,、50ul金粉懸液于EP管,；
2,、依次加入5ul/3ul質(zhì)粒DNA（1ug/ul）,50ul 2.5M CaCl2 和20ul 0.1M亞精胺（每加完一樣可振蕩3S）,，靜置10min； 
3,、振蕩3S,，冰上10min，10000rpm離心10S,，棄上清,；
4、80ul無(wú)水乙醇,，震蕩重懸,，10000rpm離心10S，棄上清,；
5,、10ul無(wú)水乙醇定容（重懸）；
6,、每次用10ul點(diǎn)于微粒載膜中央,，使其平鋪，晾至*干燥,，待用,；
基因槍的操作
1、打開(kāi)真空泵和基因槍的電源開(kāi)關(guān),；
2,、打開(kāi)氦氣瓶閥門(mén)，旋轉(zhuǎn)氦氣調(diào)節(jié)桿,，使氣壓高于所選可裂膜壓力200psi左右,；
3、旋下可裂膜擋蓋,，將可裂膜放在擋蓋中央,，將擋蓋旋上，用板水平加固；
4,、把微粒發(fā)射裝置移出轟擊室,，旋下蓋子，放入阻擋網(wǎng),，把微粒載片安裝在固定槽中（有微粒的一面朝下）,，旋上蓋子，將發(fā)射裝置放回轟擊室,；
5,、將樣品盤(pán)放置在轟擊室的適當(dāng)位置，關(guān)上轟擊室門(mén),；
6,、按VAC開(kāi)關(guān)（上檔）抽真空，當(dāng)表上讀數(shù)為所需值時(shí),開(kāi)關(guān)打到HOLD（下檔）,，然后按住FIER開(kāi)關(guān),，當(dāng)達(dá)到適當(dāng)壓力可裂膜自動(dòng)破裂，松開(kāi)FIER開(kāi)關(guān),；
7,、開(kāi)關(guān)打到VENT（中間檔），以釋放轟擊室內(nèi)的真空,；
8,、打開(kāi)轟擊室門(mén)，取出樣品盤(pán),；
9,、取出微粒發(fā)射裝置，卸下微粒載膜和阻擋網(wǎng)（阻擋網(wǎng)和微粒載膜放入70%的酒精浸泡）,；
10,、旋下可裂膜擋蓋，清除可裂膜碎片,；
11,、若PDS—1000\He 型基因槍不再使用，關(guān)掉氦氣瓶的主閥,，按住FIER開(kāi)關(guān),，按住FIE開(kāi)關(guān)，放掉氣體加速管內(nèi)的氦氣壓力,，zui后關(guān)掉一切電源,；
文章關(guān)鍵詞：基因槍