實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)是在普通PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,。在PCR反應(yīng)早期，產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,，而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數(shù)期,、線性期和平臺期，可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點(diǎn)上來檢測PCR產(chǎn)物的量,，并且由此推斷模板的含量,，實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀主要由熒光定量系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)組成。熒光定量系統(tǒng)負(fù)責(zé)監(jiān)測循環(huán)過程中的熒光信號,，而與之相連的計(jì)算機(jī)則收集這些熒光數(shù)據(jù)。通過專門的實(shí)時(shí)分析軟件,，數(shù)據(jù)可以以圖表的形式顯示出來,，便于研究人員進(jìn)行分析。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀以其高靈敏度,、高特異性,、高準(zhǔn)確性和高速度的特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于各種生命科學(xué)研究領(lǐng)域和臨床診斷中,。
基因表達(dá)分析：可以用來分析基因的表達(dá)水平,，包括mRNA轉(zhuǎn)錄量的定量、差異表達(dá)基因的篩選以及研究基因調(diào)控機(jī)制等,。這為基因功能研究提供了重要數(shù)據(jù)支持,。
病原微生物檢測：在病原微生物檢測中具有高度靈敏度和特異性，可以快速,、準(zhǔn)確地檢測微生物的存在和數(shù)量,。這使其成為疾病診斷、傳染病監(jiān)測以及食品安全檢測等領(lǐng)域的重要工具,。
基因突變檢測：可以檢測DNA序列的變異和突變,，包括單核苷酸多態(tài)性(SNP)、插入缺失(InDel)等,。這些檢測對于疾病遺傳學(xué)研究,、個(gè)體基因分型以及法醫(yī)學(xué)鑒定等領(lǐng)域具有重要意義。
DNA定量分析：還可用于定量分析DNA樣本的濃度和純度，常用于核酸提取,、質(zhì)量控制以及實(shí)驗(yàn)前的標(biāo)準(zhǔn)化處理等,。
病毒載量檢測：實(shí)時(shí)熒光定量PCR也被廣泛應(yīng)用于檢測病毒感染樣本中病毒的載量，如HIV,、HPV,、流感病毒等。這有助于醫(yī)學(xué)研究人員了解病毒感染的程度和傳播動態(tài),。
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