實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)是在普通PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,。在PCR反應(yīng)早期，產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,，而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數(shù)期,、線性期和平臺(tái)期，可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點(diǎn)上來檢測(cè)PCR產(chǎn)物的量,，并且由此推斷模板的含量,，實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀主要由熒光定量系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)組成。熒光定量系統(tǒng)負(fù)責(zé)監(jiān)測(cè)循環(huán)過程中的熒光信號(hào),，而與之相連的計(jì)算機(jī)則收集這些熒光數(shù)據(jù),。通過專門的實(shí)時(shí)分析軟件，數(shù)據(jù)可以以圖表的形式顯示出來,，便于研究人員進(jìn)行分析,。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀以其高靈敏度、高特異性,、高準(zhǔn)確性和高速度的特點(diǎn),，被廣泛應(yīng)用于各種生命科學(xué)研究領(lǐng)域和臨床診斷中。
基因表達(dá)分析：可以用來分析基因的表達(dá)水平,，包括mRNA轉(zhuǎn)錄量的定量,、差異表達(dá)基因的篩選以及研究基因調(diào)控機(jī)制等。這為基因功能研究提供了重要數(shù)據(jù)支持,。
病原微生物檢測(cè)：在病原微生物檢測(cè)中具有高度靈敏度和特異性,，可以快速,、準(zhǔn)確地檢測(cè)微生物的存在和數(shù)量。這使其成為疾病診斷,、傳染病監(jiān)測(cè)以及食品安全檢測(cè)等領(lǐng)域的重要工具,。
基因突變檢測(cè)：可以檢測(cè)DNA序列的變異和突變，包括單核苷酸多態(tài)性(SNP),、插入缺失(InDel)等,。這些檢測(cè)對(duì)于疾病遺傳學(xué)研究、個(gè)體基因分型以及法醫(yī)學(xué)鑒定等領(lǐng)域具有重要意義,。
DNA定量分析：還可用于定量分析DNA樣本的濃度和純度,，常用于核酸提取、質(zhì)量控制以及實(shí)驗(yàn)前的標(biāo)準(zhǔn)化處理等,。
病毒載量檢測(cè)：實(shí)時(shí)熒光定量PCR也被廣泛應(yīng)用于檢測(cè)病毒感染樣本中病毒的載量,，如HIV、HPV,、流感病毒等,。這有助于醫(yī)學(xué)研究人員了解病毒感染的程度和傳播動(dòng)態(tài)。
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