熒光定量基因擴(kuò)增儀原理：以探針法熒光定量PCR為例：PCR擴(kuò)增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,，該探針兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒光基團(tuán)。開始時,，探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上,，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,，檢測不到熒光信號；PCR擴(kuò)增時,，Taq酶將探針酶切降解,，使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴(kuò)增一條DNA鏈,，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步,。
傳統(tǒng)的PCR進(jìn)行檢測時,，擴(kuò)增反應(yīng)后需要進(jìn)行染色處理及電泳分離，并且只能作定性分析,，不能準(zhǔn)確定量,，易造成污染出現(xiàn)假陽性，使其應(yīng)用受到限制,。實時定量PCR技術(shù)不僅實現(xiàn)了對模板的定量,，且具有靈敏度高、特異性和可靠性更好,、自動化程度高和無污染的特點,，使得熒光定量PCR逐漸取代常規(guī)PCR。
在PCR擴(kuò)增反應(yīng)的數(shù)個循環(huán)里,，熒光信號變化不大,，接近一條直線，這樣的直線即是基線,，這條線是可以自動生成也可以手動設(shè)置的,。之后反應(yīng)會進(jìn)入指數(shù)增長期，這個期間擴(kuò)增曲線具有高度重復(fù)性,，在該期間,，可設(shè)定一條熒光閾值線，它可以設(shè)定在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段任意位置上,，但一般會將熒光閾值的缺省設(shè)置是3-15個循環(huán)的熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍,。每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)被稱為CT值，這個值與起始濃度的對數(shù)成線性關(guān)系,，且該值具有重現(xiàn)性,。
熒光定量基因擴(kuò)增儀主要用于用于科研及臨床的基因擴(kuò)增、定性PCR基因擴(kuò)增,、熒光/酶免終點定量DNA基因擴(kuò)增,、基因芯片等其他基因分析應(yīng)用的基因擴(kuò)增等?；驍U(kuò)增儀適合國內(nèi)外各種PCR試劑盒傳染病類,、腫瘤類,、科研類。進(jìn)口基因擴(kuò)增儀主要由外殼,、變溫反應(yīng)腔,、散熱系統(tǒng)、加熱系統(tǒng),、制冷系統(tǒng),、電子控制系統(tǒng)、供電系統(tǒng),、人機(jī)界面等各部分組成,?；驍U(kuò)增儀廣泛應(yīng)用于各級各類醫(yī)療機(jī)構(gòu),、大學(xué)及研究所、CDC,、檢驗檢疫局,、獸醫(yī)站、食品企業(yè)及乳品廠等,。
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