本公司專業(yè)供應Elisa試劑盒,，種屬齊全,，現貨，質量有保證,。
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實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心酶標免疫分析法測定標本中CCK水平,。用純化的抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入CCK抗原,、生物素化的抗豬CCK抗體、HRP標記的親和素,，經過*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CCK呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，計算樣品濃度,。 2. 標準品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,，蓋好后靜置10分鐘以上,，然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為1000 pmol/L，做系列倍比稀釋后,，分別稀釋成1000 pmol/L,，500 pmol/L ,，250 pmol/L，125 pmol/L,，62.5 pmol/L,，31.2 pmol/L,，15.6 pmol/L，其原液直接作為zui高標準濃度,，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pmol/L，臨用前15分鐘內配制,。 3. 溫育60分鐘后,，棄去孔內液體，甩干,，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘,，350ul/每孔，甩干,。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100ul,，37℃,，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,，棄去孔內液體，甩干,，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘，350ul/每孔,，甩干,。
6. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光顯色（30分鐘內,，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）,。
7. 依序每孔加終止溶液50ul,，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性,，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）,。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測,。
注：
1． 每次實驗留一孔作為空白調零孔,，該孔不加任何試劑,，只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調OD值至零,。
2．為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,，酶標板加上蓋或覆膜。
3. 未使用完的酶標板或者試劑,，請于2-8℃保存。標準品,、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,。請勿重復使用已稀釋過的標準品,、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液,。
4. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,，以保證檢測結果的準確性,。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層
吸水紙,，酶標板朝下用力拍幾次,；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,，浸泡1-2分鐘,，根據需要,，重復此過程數次,。
自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中,。
特異性
本試劑盒可同時檢測重組或天然的豬CCK,，且與其它相關蛋白無交叉反應,。
計算
以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標）,，在半對數坐標紙上繪出標準曲線,，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,；再乘以稀釋倍數,；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數,，即為樣品的實際濃度,。
注意事項
1． 洗滌過程非常重要,，不充分的洗滌易造成假陽性,。
2． 一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多,，推薦使用排槍加樣,。
3． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。
4． 如標本中待測物質含量過高,，請先稀釋后再測定,，計算時請zui后乘以稀釋倍數,。
5．在配制標準品,、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆,。
6．底物請避光保存,。
檢測范圍：
15.6 pmol/L -1000 pmol/L
說明
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）,。
2．有效期：6個月
3．濃洗滌液會有鹽析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
4．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正?，F象,，不會對實驗結果造成任何影響。
5．中,、英文說明書可能會有不一致之處,，請以英文說明書為準
