人ELISA試劑盒實驗操作中，須特別注意細節(jié)問題,，細節(jié)往往決定著試驗的成功與否,。關(guān)于ELISA試劑盒的實驗操作，這些細節(jié)很重要：

1,、吸取液體時速度不易太快,，以免產(chǎn)生氣泡，人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確,。

2,、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差,。

3,、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干,。

4,、合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長,。

5,、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸,，減少誤差,。

6、未使用完的酶標板或者試劑,，請于2-8℃保存,。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用,。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。

7,、要盡量做雙孔實驗,，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性，又能反映出試劑盒的精密度,。

8,、每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑,，只是最后加底物溶液及2N H2SO4,。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。

9,、手工洗板時每次加入洗滌液后,。應(yīng)靜置15～30s，不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,，防止交叉污染,。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

10,、樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,，并經(jīng)常校對其準確性。

11,、為防止樣品蒸發(fā),，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜,。

12,、ELISA試劑盒實驗中，加樣后及時放人孵箱,，標本較多時,，要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,，防止孵育時間人為延長,，導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗che底,。

13,、剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄,。

14,、對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

15、沒有去離子水或雙蒸水時,，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,，切勿使用自來水。

16,、在使用微量加樣器時,，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標準品溶液,。

17,、人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈,。