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DNA提取試劑盒,應(yīng)該如何選,?

時間:2024/5/14閱讀:381
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實驗室工作中,,經(jīng)常會需要用到純化的DNA,這時我們通常需要使用一個商業(yè)的DNA提取試劑盒對目的DNA進行分離純化,。市面上有很多類型的提取試劑盒,,當(dāng)使用不太熟悉的樣本類型時,選擇合適的盒子是尤為關(guān)鍵的,,應(yīng)該如何選擇呢,?讓我們一起來看看吧!

一,、試劑盒組分

,。然而,不同的盒子在完成每個步驟的方式上有很大的不同,。

二,、使用的樣本類型

不同的DNA來源有不同的試劑盒,從實驗室培養(yǎng)的細(xì)胞,,到臨床樣本,,土壤樣本,甚至指紋,,也有許多專門用于某些應(yīng)用的試劑盒,。

例如,土壤中的腐殖酸或血液中的血紅蛋白會污染純化的DNA,,從而干擾下游的DNA實驗(如PCR),。當(dāng)然,也有一些試劑盒會在進行純化步驟之前專門去除這些組分,。

如果想從PCR或瓊脂糖凝膠中純化DNA,,有許多方法可以提高瓊脂糖凝膠純化的回收率。

三,、基因組 VS 質(zhì)粒DNA提取

,。這是因為針對質(zhì)粒DNA的裂解步驟需要染色體DNA與細(xì)胞蛋白片段保持結(jié)合,以防止其污染最終的樣品,。兩種類型的DNA回收都有試劑盒,,甚至有可以同時純化基因組DNA和總RNA的試劑盒。

在選擇DNA提取試劑盒時,,最重要的變量可能是你所使用的生物體,。

2.動物組織:用于動物組織DNA分離的試劑盒通常具有更溫和的裂解技術(shù),,因為大多數(shù)動物細(xì)胞不像細(xì)菌細(xì)胞那樣有細(xì)胞壁。然而,,動物組織DNA提取的挑戰(zhàn)往往在于選擇合適的組織勻漿方法,。此外,許多動物DNA純化試劑盒不使用苯酚/氯仿萃取或乙醇作為沉淀步驟,,以減少破壞DNA的風(fēng)險,。

4.血液:由于技術(shù)上的許多最新進展,血液DNA分離試劑盒中有多種裂解技術(shù)和提取方法可供選擇,。從血液中分離出的DNA將在很大程度上決定你使用的裂解和提取的類型,。無論應(yīng)用是什么,一定要選擇一種能夠提供純凈,、完整,、雙鏈和濃縮DNA的試劑盒,以獲得最佳效果,。

大多數(shù)DNA分離試劑盒公司都提供含有類似成分的試劑盒,,這種試劑盒可以根據(jù)處理樣品的體積進行縮放。如下是一個基于大腸桿菌的DNA分離試劑盒推薦樣本體積的綱要,,范圍很廣,。

小量制備: >15 mL

大規(guī)模制備: 100-200 mL

甚至高達2.5-5升!

當(dāng)一次處理超過50個樣本時,不再考慮使用小量柱純化,,高通量DNA提取試劑盒是更好的選擇,,它可以以96孔的形式運行,以便在需要同時處理多個樣本的DNA的實驗,。DNA提取試劑盒有各種規(guī)格和大小,,然而,共同的主線是,,所選擇的試劑盒能產(chǎn)生干凈和濃縮的DNA,。可以定期評估DNA提取物的數(shù)量和質(zhì)量,,以確保試劑盒適合此應(yīng)用類型。



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