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蛋白質(zhì)測定儀操作方法粗談
蛋白質(zhì)測定儀操作方法粗談
蛋白質(zhì)測定儀是用于測定糧食、食品,、乳制品、飲料,、飼料,、土壤、水等物質(zhì)中氮或者蛋白質(zhì)含量的儀器,，因為所測出的物質(zhì)不僅含有蛋白質(zhì),，同時還含有游離氨基酸、嘌呤,、吡啶,、尿素、硝酸鹽和氨等物質(zhì),，因此該儀器又被稱為粗蛋白測定儀,。
蛋白質(zhì)測定儀包括兩個裝置：消化爐和蒸餾裝置，分別用來消化樣品以及蒸餾和滴定,。浙江托普生產(chǎn)的蛋白質(zhì)測定儀的消化爐有多種孔數(shù)選擇，如4孔,、8孔,、12孔和20孔，根據(jù)消化爐不同孔數(shù),，我們可以將定氮儀分為不同的型號,。如KDN-04A、KDN-08C等,。下面我們具體介紹下蛋白質(zhì)測定儀在測定蛋白質(zhì)含量時的操作步驟,。
消化：稱取經(jīng)粉碎的樣品0.5克（視含氮量而定），放入已洗滌烘干的消化管中,，加催化劑5克左右和10ml左右硫酸（如果是固體樣品,，在加濃硫酸前先加3ml左右的蒸餾水以濕潤樣品，以防止?jié)饬蛩嵊龅綇妷A發(fā)生劇烈反應）,。將消化管放入消化架的各個孔內(nèi),，然后置于消化爐上，然后開啟抽氣三通上自來水,，使抽氣三通處于吸氣狀態(tài),，接通電源開始消煮。消化管有不同的孔數(shù)區(qū)別,，你可以按照樣品數(shù)的多少來選擇,。每兩個消化爐孔共用一個進出水開關。
蒸餾：（1）打開電源,，儀器自動進入加水狀態(tài),，待加水工作完成后會自動停止,。（2）在左邊托盤放上空的消化管，右邊放上空的三角瓶,，打開水開關,。為排空管路內(nèi)空氣，實驗前請先按下加酸鍵,，待液體流順暢后停止加酸,；加堿同樣操作。按下蒸餾鍵,，儀器開始進入蒸餾狀態(tài),，待蒸氣自動從噴射管中噴出并穩(wěn)定后，關閉開關,。在左邊托盤放上已消化冷卻好的樣品,，右邊托盤放上250ml三角瓶，并使管口碰到杯底,。再打開電源,，依次按加酸、加堿,、蒸餾鍵對樣品進行蒸餾（加酸,、加堿量設定自行）。蒸餾完畢后,，將三角瓶下移,，使接收管離開液面，用水沖洗出氣口,，繼續(xù)蒸餾半分鐘后,，取下三角瓶待滴定用。第二個樣品同上方法,。（3）關開關,，關水，取下消化管,，打開側(cè)面排水夾子,，把連堿泵的膠管放入蒸餾水容器內(nèi)，打開電源開關用手按加堿按鍵抽蒸餾水清洗堿泵,，酸泵同樣清洗,，zui后關電結(jié)束。
滴定：用0.1 NHCL滴定接收瓶內(nèi)的溶液,，滴定至粉紅色時為止,，記下消耗HCL的毫升數(shù)，按下列式子計算蛋白含量：
蛋白質(zhì)%＝
式中：X—樣品中蛋白質(zhì)的含量，%
V1—樣品消耗硫酸或鹽酸標準液的體積,，ml,；
V2—試劑空白消耗硫酸或鹽酸標準液的體積，ml,；
N—硫酸或鹽酸標準溶液當量濃度,；
0.014—1N硫酸或鹽酸標準溶液1ml相當于氮克數(shù)；
m—樣品的質(zhì)量（體積）,，g（ml）,；
F—蛋白質(zhì)系數(shù)，按16%計算乘以6.25即為蛋白質(zhì),。
（空白測定：用0.1克糖代替樣品或不加樣品作空白測定）