一,、操作程序簡述

1濕法分析包括下列內(nèi)容：①濁度,，②凝集,；②精子計數(shù)及其活動力評估o

2．活動擺子百分率及其動力學(xué)測定①主觀方法；②客觀方法,。奧林巴斯顯微鏡

3．稿子計數(shù)①血細胞計數(shù)器,；②Msrkler計數(shù)池；③計算機輔助的精液分析（con-Puter-assistedsemenanalysis,CASA）,。

4．制備精液讀片桔液涂片,、精液染色、形態(tài)學(xué)分析。

在確定精子數(shù)量和活動力過程中,，無論采用何種技術(shù),，對每一個精液樣品均需用濕法或“濕操作”．此法將使檢驗人員對稿于計致、活動情況和有關(guān)動力學(xué)具有一個初步的主觀印象,，并可測定濁度和強度,；在測定稿子計數(shù)及其活動力過程中，溫度顯得很重要,。顯然,，37°是*選擇；然而,，如缺乏調(diào)節(jié)溫度的顯微鏡操作臺，整個分析過程要在此條件下完成是不可能的,。通常．精液分析在室溫中進行,。正如人們所知．室溫變化范圍很大，因此,，必須盡量控制操作區(qū)域的溫度,。

（一）方法

精液*液化后，充分混勻,，加一滴未稀釋桔液于干凈玻片上,，蓋上蓋玻片。也可用自動加樣器吸lo微升精濃加至載玻上以提高測定的可重復(fù)性,。在放大200—400倍（高倍鏡）的情況下觀察20個視野,，評價活動稻子的百分率、相對運動速度和方向以及每一高倍視野下的精于數(shù),，評價其濁度和是否有凝塊,，確定“圓形細胞”（未成熟微生物細胞和白細胞）的百分率。奧林巴斯生物顯微鏡

（二）濁度

顯然,，成熟館子在精掖中占多數(shù),。但有時也會發(fā)現(xiàn)其他細胞或碎片。來自男性生殖道的亡皮細胞也會存在于精液中,。在高倍鏡下,，偶爾發(fā)現(xiàn)上皮細胞并非病理指征。但息尿道炎的男子其棺液中可出現(xiàn)大量上皮細胞,；有時亦可見陰道源性的上皮細胞,，這種情況表明俏液樣品是經(jīng)性交中斷法收集的．此類細胞應(yīng)在報告單上注明。北京奧林巴斯顯微鏡

不成熟的病原茵細胞和白細胞也常在精液中出現(xiàn),，在染色破片上難以區(qū)別,，而應(yīng)用濕法操作法則更不可能。通常用巴氏（Papnicolaou,，PAP）染色來觀察這種“圓形細胞“（大于或等于成熟稻子的10％）,；而濕法分析有助于確定哪些樣本需用這一方法進一步制備,。應(yīng)對白細胞的確切數(shù)目和不成熟病原茵的百分串加以確定和記錄（詳見后述）。

在精液中,，還可能出現(xiàn)其他顆粒性物質(zhì)如梢膚結(jié)晶,、滑石粉和殺桔劑顆粒，如發(fā)現(xiàn)量很大,，則應(yīng)加以記錄,。粗大茵體、毛滴蟲,、念珠菌更應(yīng)加以報告,。

（三）凝集

徠卡顯微鏡在某些（非全部）含抗精子抗體的桔液樣本中，精于可能發(fā)生自發(fā)性凝集,，應(yīng)在主觀判斷的基礎(chǔ)上加以報告并記錄凝集類型和程度,，凝集程度的評價用0-Ⅳ表示（表44）。精子凝集方式注明為：頭—頭,、頭—尾,、尾—尾或混合型。有時出現(xiàn)格子粘附于碎片或其他顆粒性物質(zhì)的現(xiàn)象,，應(yīng)與真性凝集區(qū)別開來,。這種現(xiàn)象除非根嚴重，否則一般不作報告,。出現(xiàn)精于凝集提示應(yīng)作特異性抗精子抗體的檢測（見有關(guān)章節(jié)）,。

（四）評估精于數(shù)、活動率及其動力學(xué)

在精液分析報告中應(yīng)記錄棺子數(shù),，避免出現(xiàn)少數(shù),、幾個、很多,、大量館子等主觀性估計,。但是，如果每高倍視野觀察到大量精子而實際計數(shù)所反映數(shù)量有所下降,，應(yīng)該懷疑結(jié)果的難確性,，并重新化驗；徠卡顯微鏡此外,，還應(yīng)對精子活動串（25％,、50％、75％或大于80％）和動力學(xué)特征（緩櫻隨意運動和快速直線運動）作出主觀評價,，并與以客觀方法測定的結(jié)果相比較,。顯然這種方法的主觀性很強，在測定者之間甚至同一測定者身上易產(chǎn)生差異。然而,，這些“主觀的粗略分析”常會提示客觀分析方法的潛在錯誤,。