高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動相可選擇的范圍寬,，固定相的種類繁多,，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質,。與試樣預處理技術相配合，HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度,，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題的方法,。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度,、速度快,、色譜柱可反復利用,，流出組分易收集等優(yōu)點，因而被廣泛應用到生物化學,、食品分析、醫(yī)藥研究,、環(huán)境分析,、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發(fā)展方向,。液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視,，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等,；液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類，海水中的不揮發(fā)烴類,，使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展,。
液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離,，而后分析鑒定的儀器,。廣泛應用到生物化學,、食品分析、醫(yī)藥研究,、環(huán)境分析,、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發(fā)展方向,。
液相色譜儀工作原理：統(tǒng)由儲液器、泵,、進樣器,、色譜柱、檢測器,、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中液相色譜儀的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經進樣器進入流動相,，被流動相載入色譜柱（固定相）內,，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出,，通過檢測器時,，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進樣系統(tǒng),、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)和數據處理系統(tǒng),。
液相色譜儀如何使用：
1．檢查溶劑托盤托盤上的溶劑是否足量，以溶劑液面超過過輸液管過濾頭5厘米以上為宜,。
2．檢查輸液管內部有否氣泡，若有,，應及時通過排液閥排出,。
3．對溶劑（針對第1項看是否需要補充溶劑）和樣品進行處理，過濾,，脫氣。
4．打開主機電源,，依次打開檢測器,，泵A，泵B,，柱箱的電源
5．打開電腦,，開啟色譜工作站
6．先在工作站中開啟活塞泵,，以所需的流動相平衡系統(tǒng)（約需30min）
7．打開氘燈，等待系統(tǒng)基線走穩(wěn)
8．開始進樣檢測
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