液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵,、進樣器,、色譜柱、檢測器,、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時, 經(jīng)過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
液相色譜柱故障排除
1,、柱壓過高
可能是微粒堵塞,，柱床膨脹不可逆吸附，細菌生長等造成的,。也有可能是系統(tǒng)反壓問題,，例如阻尼器堵塞，進樣器堵塞,， 管路或連接口堵塞． 在線過濾器不干凈,， 壓力傳感器不準確等。
2,、重復性差,、不出峰、回收率低可能是色譜柱被污染,， 流動相 p H值或者組成不合適造成固定相損失 ,， 樣 品溶劑 不同或樣品本身不穩(wěn)定， 固定 相極性過強或者流動相極性過弱． 或者發(fā)生非特異性吸附,。也可能梯度實驗時平衡時間不足,，溫度波動， 流動相組成改變,， 樣品溶劑不同,，樣品穩(wěn)定性不好，方法的開發(fā)不好,，緩沖液的酸堿度不合適或者緩沖能力不足,。
3、柱效低
可能是色譜柱被污染,、 過濾片部分堵塞,、色譜柱內(nèi)的死體積造成，例如流動相p H值或者組成不合適造成固定相損失,。 流動相急劇變化造成固定相物理損壞,， 機械振動造成固定相產(chǎn)生裂縫，柱床收縮或干枯,。也有可能是儀器連接的問題,， 認真檢查進樣器,、檢測器、 管路,、 保護柱和在線過濾器等是否連接好,，也可能是色譜柱沒有平衡好， 進樣量過大等問題,。
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