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免疫熒光技術(shù)(IFT)診斷禽流感
閱讀:391 發(fā)布時(shí)間:2010-12-30免疫熒光技術(shù)就是熒光抗體技術(shù)(FAT),。IFTzui早用于病毒的鑒定和定位病毒感染細(xì)胞中特異性抗原,,主要是核內(nèi)熒光,。用M1抗原的熒光抗體主要出現(xiàn)胞質(zhì)熒光,,核內(nèi)也有部分熒光,。
IFT早在1961年就開(kāi)始用于人類(lèi)流感的快速診斷,1984年賓夕法尼亞州暴發(fā)禽流感時(shí)Skeeles將IFT用于AIV的檢測(cè),。用于禽流感病毒的診斷常用直接熒光抗體法,,即在組織觸片上直接染色、以熒光顯微鏡檢查熒光,。一種AIV的熒光抗體可用來(lái)檢測(cè)不同亞型的其他病毒,。IFT用于禽流感的診斷具有快速、簡(jiǎn)便和敏感性好的特點(diǎn),,而且檢測(cè)成本費(fèi)用相對(duì)較低,,其敏感度與病毒的分離鑒定相當(dāng),有時(shí)高于用雞胚進(jìn)行的病毒分離,。但是需要注意的是如何避免和降低標(biāo)本中出現(xiàn)的假陽(yáng)性(即非特異性熒光)問(wèn)題,。
對(duì)一株雜交瘤細(xì)胞分泌的流感病毒的單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè)時(shí),發(fā)現(xiàn)間接固相免疫熒光技術(shù)的敏感性比HI高40~150倍,。間接免疫熒光技術(shù)也可以用來(lái)檢測(cè)核蛋白(N尸)和基質(zhì)蛋白(M1)抗原與抗體的反應(yīng),,其敏感性很高。該反應(yīng)對(duì)抗原制備要求較高,,需用非離子型去污劑對(duì)純化的病毒粒進(jìn)行裂解,。
由于單克隆抗體的問(wèn)世,大大提高了免疫熒光測(cè)定的效果,。免疫熒光用于禽流感的診斷具有快速(2h之內(nèi)),、特異和敏感性高的特點(diǎn),但是其不能鑒別HA和NA亞型,,而且需要特殊的設(shè)備(熒光顯微鏡),,且工作人員需具有一定的經(jīng)驗(yàn),所以在基層檢測(cè)單位推廣應(yīng)用具有一定的局限性。