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一,、基本原理
　　霉菌菌絲較粗大，細胞易收縮變形,，而且孢子很容易飛散,，所以制標本時常用乳酸石炭酸棉藍染色液。此染色液制成的霉菌標本片其特點是：（a）細胞不變形,；（b）具有殺菌防腐作用,，且不易干燥，能保持較長時間,；（c）溶液本身呈藍色,，有一定染色效果,。
　　霉菌自然生長狀態(tài)下的形態(tài)，常用載玻片觀察,，此法是接種霉菌孢子于載玻片上的適宜培養(yǎng)基上,，培養(yǎng)后用顯微鏡觀察。此外,，為了得到清晰,、完整、保持自然狀態(tài)的霉菌形態(tài)還可利用玻璃紙透析培養(yǎng)法進行觀察,。此法是利用玻璃紙的半透膜特性及透光性,，將霉菌生長在覆蓋于瓊脂培養(yǎng)基表面的玻璃紙上，然后將長菌的玻璃紙剪取一小片,，貼放在載玻片上用顯微鏡觀察,。
二、器材
　　曲霉（Aspergillussp．）,，青霉（Penicillium sp．）,，根霉（Rhizopus sp．），毛霉（Mucor sp．）,；
　　乳酸石炭酸棉藍染色液,，20％甘油，查氏培養(yǎng)基平板,，馬鈴薯培養(yǎng)基,；無菌吸管，載玻片,，蓋玻片,，U形棒，解剖刀,，玻璃紙,，濾紙等。
三,、操作步驟
　　1．一般觀察法
　　于潔凈載玻片上,，滴一滴乳酸石炭酸棉藍染色液，用解剖針從霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲置染色液中,，再細心地將菌絲挑散開,，然后小心地蓋上蓋玻片，注意不要產生氣泡,。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察,，必要時再換高倍鏡。
　　2．載玻片觀察法
　?。?）將略小于培養(yǎng)皿底內徑的濾紙放入皿內,，再放上U形玻棒,，其上放一潔凈的載玻片，然后將二個蓋玻片分別斜立在載玻片的兩端,，蓋上皿蓋,，把數(shù)套（根據(jù)需要而定）如此裝置的培養(yǎng)皿疊起，包扎好,，用1．05kg/cm2,，121．3℃滅菌20分鐘或干熱滅菌，備用,。
　?。?）將6—7ml滅菌的馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基倒入直徑為9cm的滅菌平皿中，待凝固后,，用無菌解剖刀切成0．5—1cm2的瓊脂塊，用刀尖鏟起瓊脂塊放在已滅菌的培養(yǎng)皿內的載玻片上,，每片上放置2塊,。
　　（3）用滅菌的尖細接種針或裝有柄的縫衣針,，?。ㄈ庋鄯侥芸匆姷模┮稽c霉菌孢子，輕輕點在瓊脂塊的邊緣上,，用無菌鑷子夾著立在載玻片旁的蓋玻片蓋在瓊脂塊上,，再蓋上皿蓋。
　?。?）在培養(yǎng)皿的濾紙上,，加無菌的20％甘油數(shù)毫升，至濾紙濕潤即可停加,。將培養(yǎng)皿置28℃培養(yǎng)一定時間后,，取出載玻片置顯微鏡下觀察。
　　3．玻璃紙透析培養(yǎng)觀察法
　?。?）向霉菌斜面試管中加入5ml無菌水,，洗下孢子，制成孢子懸液,。
　?。?）用無菌鑷子將已滅菌的、直徑與培養(yǎng)皿相同的圓形玻璃紙覆蓋于查氏培養(yǎng)基平板上,。
　?。?）用1ml無菌吸管吸取0．2ml孢子懸液于上述玻璃紙平板上，并用無菌玻璃刮棒涂抹均勻,。
　?。?）置28℃溫室培養(yǎng)48小時后,，取出培養(yǎng)皿，打開皿蓋,，用鑷子將玻璃紙與培養(yǎng)基分開,，再用剪刀剪取一小片玻璃紙置載玻片上，用顯微鏡觀察,。
四,、實驗報告