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ID8是中性粒細(xì)胞的激活劑和趨化因子,；本法通過(guò)檢測(cè)中性粒細(xì)胞的遷移距離來(lái)反映IL-8活性,。
（1）配制2倍濃度的DMEM培養(yǎng)液100mL，其中含20mL的FCS,，75mgNaHC03,，置48C水浴預(yù)溫。
（2）配制2％瓊脂糖,，水浴中保溫48℃左右時(shí),，與上述2XDMEM等量混勻。
（3）制片（3mlJ片）,，室溫凝固后,，放4~C 30～60min進(jìn)一步凝固，打孔。
（4）分離人外周血中性粒細(xì)胞,，用DMEM調(diào)整細(xì)胞濃度為2．5×105／mL,，取lOgL細(xì)胞懸液加人各組中心孔，上孔分別加10／uL含趨化因子的待檢樣品及rlL-8或其他陽(yáng)性對(duì)照趨化因子,，下孔加lOgLDMEM作陰性對(duì)照,。
（5）將玻片放濕盒中，37~C溫育2h后,，甲醇固定30min,，瑞氏染液染片并干燥。
（6）顯微鏡下分別測(cè)量細(xì)胞從中心孑L邊緣朝向樣品孔游走的距離（趨化游走距離）及朝向陰性對(duì)照孔的游走距離（自發(fā)游走距離）,，趨化活性以趨化指數(shù)表示,。
為證實(shí)樣品中趨化效應(yīng)是IL-8特異的，還需將抗IL-8中和抗體先與待測(cè)樣品混合,，孵育1h后,，加入玻片孔中，觀察趨化反應(yīng),。亦可用其他相關(guān)抗體阻斷試驗(yàn)區(qū)別IL-8及其他趨化因子的作用,。