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聚乙二醇(polyethylene glycol,，PEG)是一種無電荷的直鏈大分子多糖，可非特異性地引起蛋白質(zhì)沉淀。沉淀具有可逆性,，被沉淀的蛋白質(zhì)生物活性亦不受影響,。不同濃度的PEG可沉淀分子量不同的蛋白質(zhì)，在pH值,、離子濃度等條件固定時,，蛋白質(zhì)分子量越大，用以沉淀的PEG濃度越小,。由于PEG 6000對蛋白質(zhì)沉淀具有良好的選擇性,，所以在IC測定中主要采用PEG 6000。

PEG使IC沉淀的機理可能在于使其自液相中空間排斥而析出,，此外,，PEG還可抑制CIC解離，促進CIC進一步聚合成更大的凝聚物而被沉淀,。在被檢血清中加入低濃度PEG,，可將血清中的IC沉淀下來，利用透光率比濁或散射比濁法可測出CIC的存在與含量,。本法簡便易行,，國內(nèi)已廣泛應(yīng)用。

(一)試劑
1．0．1mol／L pH8．4硼酸鹽緩沖液(borate buffer solution,，BBS) 硼酸(H3B03)3.40g,，硼砂(Na2B407·10H20)4．29g，蒸餾水溶解后,，加至1 000mL,。用G3或G4玻璃濾器過濾。
2．PEG-NaF稀釋液 PEG 6 000 40．9g,，NaF 10．0g,，用BBS溶解后加至1 000mL，用G3或G4玻璃濾器過濾,。
3．熱聚合人IgG 將人IgC(10mg/mL)置63℃水浴加熱15rain,，立即置冰浴內(nèi)，冷卻后過Sepharose4B柱或SephacrylS-300柱,，收集*蛋白峰,。所獲熱聚合人IgG可用考馬斯亮藍法測定蛋白含量。也可取人IgG(10mg/mL)10mL,，攪拌下滴加1．8％戊二醛100uL,，24h后加入0．4mol/LpH5．4，Tris-HCl緩沖液100uL終止反應(yīng),，過Sepharose 4B或Sephacryl S-300柱,，用0．01mol／LpH7．4磷酸鹽緩沖液洗脫,，收集*蛋白峰,。加入牛血清白蛋白至0．5％,，分裝后—40℃保存。試驗中可用作陽性對照和制備標(biāo)準曲線,。

(二)操作步驟
1．取待測血清0．15mL,，加BBS0．3mL(1：3稀釋)。
2．按表10—1加入各液(待測血清zui終稀釋倍數(shù)為1：33,，PEGzui終濃度為3．64％),。
3．將測試管及對照管置37℃水浴60rrfin。
4．分光光度計在波長495nm測吸光度,，用對照管調(diào)零,。

(三)結(jié)果判斷
待測血清濁度值：(測定管吸光度—對照管吸光度)X100。以大于正常人濁度值的均值加2個標(biāo)準差為CIC陽性,。
參考值：4．3±2．0,，以大于或等于8．3為CIC陽性?；蛞圆煌瑵舛葻峋酆先薎gG按以上方法操作制備標(biāo)準曲線,，根據(jù)待測血清吸光度值查標(biāo)準曲線，即可得IC含量(相當(dāng)于熱聚合人IgG的ug/mL),。

(四)注意事項
1．低密度脂蛋白可引起濁度增加,，故應(yīng)空腹采血。
2．高丙球血癥或血脂含量過高及標(biāo)本反復(fù)凍融,，均可導(dǎo)致IC檢測出現(xiàn)假陽性,。
3．此法快速、簡便,，但特異性較差,，較適用于血清標(biāo)本的篩查。