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用低濃度PEG將IC沉淀,，沉淀物中加入補體,，以溶血反應(yīng)檢測補體消耗率,。
(一)試劑
1．熱聚合人ISC：制備方法同PEG沉淀試驗。
2．硼酸緩沖鹽水(朋S) 含硼酸0．1mol/L,，硼砂25mmol/L,，NaCl 75mmol/L，調(diào)整為pH8.4
3．PEG 用BBS將PEG配成12.5%和2.5%,。
4．0.2mol/L EDTA-Na2用1mol/L NaOH調(diào)整為pH7．2,。
5．5XVB保存液 NaCl 85,，0g，巴比妥5．75g,，巴比妥鈉3．75g,，加蒸餾水約1 500ral，加熱溶解后補加蒸餾水至2000mL,。
6．GVB2+5×VB保存液400mL,，0．03mol/LCaCl210mL，0．1mol/L MgCl2 10mL,，2％明膠lOOmL,，補加蒸餾水至2000mL，pH7．5,。
7．致敏綿羊紅細(xì)胞(SRBC) 2％SRBC懸液加等量1：1 000溶血素,，37t水浴l0min，用GVB2+將致敏SRBC配成1．5×108/mL,。
8．人補體與健康人對照血清 選用總補體溶血活性正常的健康人血清數(shù)份混合,，作為補體來源。自3名健康人各取血清50mL,，各按lmLl份分裝,，—70℃凍存，每次取3份血清作為對照,。

(二)操作步驟
1．待測血清0．3mL,，加0．2mol/L EDTA-Na2和BBS各50uL，充分混勻后加入12,。5％PEG 0．1mL,，混勻，置4℃ 90rain,。
2．4℃ 1 700r／rain離心10min,，棄上清，沉淀物用2．5％PEG洗1次,，用玻璃棒攪拌,，再于4℃ 1 700r/min離心15min，棄上清,，管口余水用濾紙吸除,。
3．加入37℃ 30min預(yù)溫的GV鏟’30uL，待沉淀溶解后,，加入混合人補體10uL(用微量加樣器準(zhǔn)確加入),。混勻,，置37℃,，使補體與IC充分反應(yīng),。
4．加入1．5X108／mL致敏SRBCl．0mL，37℃水浴振蕩60rain,。取出后立即加人4℃冷生理鹽水6．5mL,，離心，吸取上清液于414mn波長測吸光度,。
5．每批試驗以熱聚合人IgG 5,、10、25,、50,、lOOug/mL制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線換算成相當(dāng)于熱聚合人IgG的ug/mL,。