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當采用血凝和血凝抑制將分離到的病毒鑒定為NDV時,，并不能確定其暴發(fā)新城疫。根據(jù)OIE的規(guī)定,，還必須對分離到的病毒進行毒力測定,。評價新城疫病毒的毒力指標有3個，即zui小致死量致死雞胚平均死亡時間（MDT）,、1日齡雛雞腦內接種致病指數(shù)（1CPl）和6周齡雛雞靜脈接種致病指數(shù)（1VPl）,。

（1）ICPI測定 首先取血凝滴度為2‘以上的新鮮感染雞胚尿囊液，在生物安全柜中用滅菌生理鹽水稀釋10倍,；將稀釋好的病毒液用微量一次性注射器腦內接種在隔離器中飼養(yǎng)的1日齡SPF雛雞,，每份樣品接種10只，每只接種0．05mi，并設生理鹽水和標準毒株陽性對照,。將接種雞在隔離器中隔離飼養(yǎng),，每24h觀察一次，連續(xù)觀察8天,，每天觀察即應給雞打分,，正常雞記作0，病雞記作1,，死亡雞記作2（死亡雞在死后每天觀察都記作2）,。ICPI是指每只雞8天內所有觀察計分總數(shù)的平均數(shù)。按照下列公式計算其ICPI,。
8天累計發(fā)病數(shù)X1+8天累計死亡數(shù)X2

CPI=8天累計發(fā)病數(shù)×1+8天累計死亡數(shù)×2÷8天累計麗熏雞的總數(shù)

ICPl值越大,，NDV致病性越強。zui強毒力病毒的ICPI接近2．o,，而弱毒株毒力的ICPI值為0,。

（2）IVPI測定 在生物安全柜中將血凝滴度為2‘以上的新鮮感染尿囊液，用滅菌生理鹽水稀釋l0倍,；翅靜脈接種10只在隔離器中飼養(yǎng)的6周齡SPF小雞,，每只0．1ml。并設生理鹽水和標準毒株陽性對照,，隔離飼養(yǎng),。每24h對接種的雞觀察一次，連續(xù)觀察l0天,，每天觀察應給雞打分,，正常雞記作0，病雞記作1,，癱瘓雞或有其他神經癥狀的記作2,，死亡雞記作3（死亡雞在死后的每天觀察都記作3。IVPI是10天內每次觀察每只雞的記錄總數(shù)的平均數(shù),。按照下面列出的公式計算其1VPl,。

IVPI= 10天累計發(fā)病數(shù)×1+10天累計癱瘓數(shù)× 2+10天累計死亡數(shù)× 3÷10天累計觀察雞只總數(shù)

IVPI值越大,，NDV致病性越強,。zui強毒力的病毒的IVPI值可達3．0，弱毒株的IVPI值為0,。

（3）MDT測定 在生物安全柜中將新鮮感染尿囊液,，用含有青鏈霉素的滅菌生理鹽水稀釋成10-6- 10-9個不同稀釋度，每個稀釋度分別接種5只9-l0日齡SPF雞胚,，每只接種o．1ml稀釋好的病毒液,；置于孵化器37~C孵育，每天早晚觀察2次，間隔12h,，棄去24h之內死亡的雞胚尿囊液,。連續(xù)觀察7天，每次觀察都應記錄雞胚死亡的時間,。取能夠致死所有雞胚的病毒zui大稀釋倍數(shù)作為該病毒的zui小致死量（MLD）,。MDT是指zui小致死量引起雞胚死亡的平均時間。按照下表公式計算其MDT,。MDT低于60h為強毒型NDV
MDT值在60—90h為中等毒力型NDV,；MDT大于90h為低毒力NDV。

MDT=（Xh死亡胚數(shù)×Xh+YL死亡胚數(shù)×Yh+…）÷死亡胚總