技術(shù)文章
瓊脂凝膠擴散試驗(AGP)診斷禽流感
閱讀:972 發(fā)布時間:2011-6-16瓊脂凝膠擴散試驗(AGP)診斷禽流感
點擊次數(shù):3 發(fā)布時間:2011-3-24
AGP是在瓊脂凝膠中進行的抗原-抗體免疫沉淀反應(yīng),,主要用于病毒抗原型特異性鑒定,,即用已知陽性血清和未知抗原進行AGP試驗,。AGP是用來檢測A屬(型)流感病毒特異性血清抗體,,即抗RNA-核蛋白(即RNP)和基質(zhì)蛋白(M1)抗體,因而適用于鑒定流感病毒,。1970年Beard將AGP用于禽流感Ab的檢測,。
該法優(yōu)點是簡便快捷,,特異性強,不受病毒亞型限制,,缺點是靈敏性較低,。
目前AGP法中zui常用的是免疫雙擴散,與普通AGP法相比,,不僅提高了其敏感度,,且快速省時,以此法為獲得了良好的結(jié)果,。Ag制備:感染雞胚尿囊膜磨碎,,反復(fù)凍融或超聲裂解,然后低速離心,,上清滅活即可,。1987年,我國學(xué)者報道了用AIV尿囊液經(jīng)超速離心,、濃縮,,用福爾馬林滅活制備Ag,效果較好,。趙增連等在瓊脂板中加入3%的PECk6000,,則AGP的敏感性提高,,且快速省時,。
免疫單輻射擴散試驗、單輻射溶血試驗,、對流免疫電泳等也常用于AIV及其抗體的檢測,,但這幾種免疫沉淀試驗都需在凝膠中進行,敏感性較差,,對低滴度樣品都會出現(xiàn)假陽性結(jié)果,,而且AGP所需試劑及Ag、Ab的量較大,。所以尋找更敏感的微量,、快速的檢測和診斷方法很有必要。