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[器材和試劑]

●  L8—M Beckman超速離心機或與其相當的機型

●  吊桶式SWTi4l轉頭或相當類型

●  氯化銫（Sigma）

●  PBS

●  純化的噬菌體樣本

 

[方法]

1．在每毫升zui后的噬菌體懸液（例如來自實驗方案13．11）中，加入0．45 g氯化銫,，充分混勻至溶解,。

2．用吊桶式轉頭  （或與其相當的型號）  離心溶液，15℃17h,，噬菌體將濃縮在組分1和組分2中（,。組分1的濃度較高，但組分2的體積較大,。用巴氏滴管或塑料注射器吸取這些組分,。如果是*次使用本實驗方案，那么先收集所有條帶并分別對其檢測將是明智之舉,。

3．將收獲的溶液對PBS透析過夜,。

4．通過感染大腸桿菌DH5cF，或TGl滴定各個不同組分中噬菌體,，并保存滴度zui高的組分,。通常，噬菌體會集中在1個區(qū)帶內,，而較少的數量會分散在其他區(qū)帶（如果可見）,。加入甘油至10％；按每份樣本10¹³個噬菌體等量分裝并儲存于-80℃,。更進一步的質量控制則可進行蛋白雜交印跡，采用抗標簽抗體或抗pⅢ抗體,。

用氯化銫純化噬菌粒,。

離心后離心管外觀如圖示。噬菌體主要濃縮于碎片樣區(qū)帶（組分1）和其下的乳白色區(qū)帶（組分2）,。兩條區(qū)帶均需收集