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基因測序儀的技術(shù)原理

閱讀:875        發(fā)布時(shí)間:2023-10-29
基因測序技術(shù)也稱作dna測序技術(shù),,即獲得目的dna片段堿基排列順序的技術(shù),,獲得目的dna片段的序列是進(jìn)一步進(jìn)行分子生物學(xué)研究和基因改造的基礎(chǔ)。
 
基因測序儀(即DNA測序儀),,是一臺(tái)能自動(dòng)灌膠,、自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)數(shù)據(jù)收集分析等全自動(dòng)電腦控制的測定基因片段的高檔精密儀器,。
 
技術(shù)原理:
 
在分子生物學(xué)研究中,,基因的序列分析是進(jìn)一步研究和改造目的基因的基礎(chǔ)。用于測序的技術(shù)主要有Sanger等,。發(fā)明的雙脫氧鏈末端終止法,。Sanger法是根據(jù)核苷酸在某一固定的點(diǎn)開始,隨機(jī)在某一個(gè)特定的堿基處終止,,產(chǎn)生A,,T,,C,G四組不同長度的一系列核苷酸,,然后在尿素變性的PAGE膠上電泳進(jìn)行檢測,,從而獲得DNA序列。Sanger測序法得到了廣泛的應(yīng)用,。
 
Sanger法測序的原理就是利用一種DNA聚合酶來延伸結(jié)合在待定序列模板上的引物,,直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個(gè)單獨(dú)的反應(yīng)構(gòu)成,,每個(gè)反應(yīng)含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸,,并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3'-OH基團(tuán),,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在G,、A、T或C處終止,終止點(diǎn)由反應(yīng)中相應(yīng)的雙脫氧而定,。

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