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1.每次配置時,，要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi)，查看其開瓶日期及瓶口密封性,，保證其未變質(zhì),，并且未吸潮。

2.培養(yǎng)基配置時,，稱量要準(zhǔn)確,，包括鹽水的分裝要準(zhǔn)確,。

3.一定要保證現(xiàn)配制現(xiàn)滅菌，未滅菌的配好培養(yǎng)基不能長時間放置,，更不可隔夜,。

4.滅菌時要保證恒溫、恒壓,，同時要保證有效滅菌時間,。

5.滅菌過的培養(yǎng)基要冰箱保存，可保存一周,，一般不超過 3 天,。而且要遵循“先入先出"原則，先配制的要先使用,。

6.在使用時,，要根據(jù)當(dāng)班次的使用量，用水浴鍋先將培養(yǎng)基溶化為液態(tài),，然后及時調(diào)低水域溫度（先化好的可從水域取出,，放在水浴鍋鍋蓋上）待用，千萬不可長時間使培養(yǎng)基處于高溫狀態(tài),。

7.做產(chǎn)品微生物檢測時,，傾倒培養(yǎng)基溫度在 45℃左右，不可過燙,，避免將菌燙死,；也不可過涼，化好的培養(yǎng)基又結(jié)塊凝固,，不便于觀察結(jié)果,。

8.每瓶培養(yǎng)基均要做空白。

9.盡量集中做樣,，避免頻繁打開同一瓶培養(yǎng)基瓶塞,，增大培養(yǎng)基的污染幾率，出現(xiàn)誤差結(jié)果,。

10.培養(yǎng)基剩余過少時,，可先將其傾倒成空白用板。

一,、大環(huán)境（房間）

1.做樣時,，窗戶和空調(diào)要關(guān)閉，或用酒精對房間進(jìn)行噴霧消毒,，避免房間內(nèi)空氣流通影響超凈臺內(nèi)部環(huán)境（最好在有通排風(fēng)系統(tǒng)的恒溫恒濕無菌間進(jìn)行操作）,。

2.如果在原來的原料微生物檢測室進(jìn)行做樣，要定期開啟紫外燈,，對房間進(jìn)行殺菌,。

二,、小環(huán)境（超凈臺）

1.定期清潔初效過濾器，要及時更換,。

2.做樣前,，將超凈臺內(nèi)部進(jìn)行清潔，用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,，并提前半小時將超凈臺紫外燈打開,，對超凈臺內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行殺菌。

3.關(guān)紫外燈,，開風(fēng)機(jī),，調(diào)整合適進(jìn)風(fēng)量，風(fēng)量不可過低,。

4.每次做樣后,，要對超凈臺內(nèi)部進(jìn)行清理、清潔,，并用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,。

5.紫外燈根據(jù)其使用壽命要及時更換。

6.做樣同時,，要做上相應(yīng)菌落檢測的環(huán)境空白,。

7.做樣區(qū)域的選擇：

①一般在距離超凈臺外沿的 1/3-2/3 區(qū)域進(jìn)行無菌操作；

②要在酒精燈火焰的外焰保護(hù)區(qū)域進(jìn)行操作,。

一,、保證采樣器具的無菌性

1.玻璃器皿：采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌，保證恒溫,、時間足夠（但不可時間過長,，導(dǎo)致玻璃器皿易裂紋而報廢）。

2.取樣筐：使用前要用 75%酒精進(jìn)行噴灑消毒

3.取樣勺,、濃奶取樣提子：要保證其清潔消毒，清潔后用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,。

4.取樣袋：可現(xiàn)用酒精進(jìn)行擦拭消毒,，再在超凈臺用紫外燈照射消毒,，（包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒）。

5.電子稱表面用 75%酒精消毒,。

二,、人員操作

1.保證手部的清洗、消毒：取樣前及做樣前都要先洗手再消毒,。

2.取樣要具有代表性（隨機(jī)樣,、目的樣、綜合樣）且要標(biāo)示清楚,。

3.取樣完畢,，不可在車間逗留，要及時將樣品放入超凈臺,，對其外表面進(jìn)行紫外燈照射消毒,。

4.在要求的做樣區(qū)域進(jìn)行操作。

5.做樣前,，要用 75%酒精棉球?qū)悠反诓窟M(jìn)行擦拭消毒,，再開口。

6.往鹽水瓶加樣品時,，要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口,。

7.樣品計量要準(zhǔn)確，稀釋倍數(shù)也要準(zhǔn)確（1mL 吸管不允許將管口敲掉）,，進(jìn)行 100 倍稀釋時,，1mL 吸管要伸入鹽水中，不可以將樣品管壁流下去,，同時要避免將管底部捅破,。

8.鹽水溫度以 40℃左右為宜，不能過熱,，將部分微生物燙死,，也不能溫度太低，不能將奶粉溶解*,。

9.進(jìn)行稀釋時,，要搖勻，保證溶液的均一性,。

10.傾倒平皿時,，要注意培養(yǎng)基瓶口不要接觸到平皿；傾倒的培養(yǎng)基要適量,，不可以太少,，在培養(yǎng)過程中干掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右為宜,。

11.做大腸菌群樣時,，要提前將乳糖膽鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)管按需要量備好，放入超凈臺對外表面進(jìn)行紫外線滅菌,。

12.接二步時,，要注意先將接種針（環(huán)）進(jìn)行冷卻，避免出現(xiàn)接不上菌落的情況發(fā)生,，導(dǎo)致無法判斷,、確認(rèn)。

13.做樣完畢,，及時放入相應(yīng)培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),，并清理清潔超凈臺。

1.在培養(yǎng)過程中,，要隨時監(jiān)控培養(yǎng)箱溫度,，保證其在適宜的溫度進(jìn)行培養(yǎng)。

2.要按照《微生物檢驗規(guī)范》要求及時觀察結(jié)果,，出現(xiàn)異常,，要及時分析原因進(jìn)行反饋。