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1.每次配置時(shí)，要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi),，查看其開瓶日期及瓶口密封性,，保證其未變質(zhì)，并且未吸潮,。

2.培養(yǎng)基配置時(shí),，稱量要準(zhǔn)確，包括鹽水的分裝要準(zhǔn)確,。

3.一定要保證現(xiàn)配制現(xiàn)滅菌,，未滅菌的配好培養(yǎng)基不能長時(shí)間放置，更不可隔夜。

4.滅菌時(shí)要保證恒溫,、恒壓,，同時(shí)要保證有效滅菌時(shí)間。

5.滅菌過的培養(yǎng)基要冰箱保存,，可保存一周,，一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出"原則,，先配制的要先使用,。

6.在使用時(shí)，要根據(jù)當(dāng)班次的使用量,，用水浴鍋先將培養(yǎng)基溶化為液態(tài),，然后及時(shí)調(diào)低水域溫度（先化好的可從水域取出,，放在水浴鍋鍋蓋上）待用,，千萬不可長時(shí)間使培養(yǎng)基處于高溫狀態(tài)。

7.做產(chǎn)品微生物檢測時(shí),，傾倒培養(yǎng)基溫度在 45℃左右,，不可過燙，避免將菌燙死,；也不可過涼,，化好的培養(yǎng)基又結(jié)塊凝固，不便于觀察結(jié)果,。

8.每瓶培養(yǎng)基均要做空白,。

9.盡量集中做樣，避免頻繁打開同一瓶培養(yǎng)基瓶塞,，增大培養(yǎng)基的污染幾率,，出現(xiàn)誤差結(jié)果。

10.培養(yǎng)基剩余過少時(shí),，可先將其傾倒成空白用板,。

一、大環(huán)境（房間）

1.做樣時(shí),，窗戶和空調(diào)要關(guān)閉,，或用酒精對房間進(jìn)行噴霧消毒，避免房間內(nèi)空氣流通影響超凈臺(tái)內(nèi)部環(huán)境（最好在有通排風(fēng)系統(tǒng)的恒溫恒濕無菌間進(jìn)行操作）,。

2.如果在原來的原料微生物檢測室進(jìn)行做樣,，要定期開啟紫外燈，對房間進(jìn)行殺菌,。

二,、小環(huán)境（超凈臺(tái)）

1.定期清潔初效過濾器，要及時(shí)更換,。

2.做樣前,，將超凈臺(tái)內(nèi)部進(jìn)行清潔,，用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒，并提前半小時(shí)將超凈臺(tái)紫外燈打開,，對超凈臺(tái)內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行殺菌,。

3.關(guān)紫外燈，開風(fēng)機(jī),，調(diào)整合適進(jìn)風(fēng)量,，風(fēng)量不可過低。

4.每次做樣后,，要對超凈臺(tái)內(nèi)部進(jìn)行清理,、清潔，并用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,。

5.紫外燈根據(jù)其使用壽命要及時(shí)更換,。

6.做樣同時(shí)，要做上相應(yīng)菌落檢測的環(huán)境空白,。

7.做樣區(qū)域的選擇：

①一般在距離超凈臺(tái)外沿的 1/3-2/3 區(qū)域進(jìn)行無菌操作,；

②要在酒精燈火焰的外焰保護(hù)區(qū)域進(jìn)行操作。

一,、保證采樣器具的無菌性

1.玻璃器皿：采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌,，保證恒溫、時(shí)間足夠（但不可時(shí)間過長,，導(dǎo)致玻璃器皿易裂紋而報(bào)廢）,。

2.取樣筐：使用前要用 75%酒精進(jìn)行噴灑消毒

3.取樣勺、濃奶取樣提子：要保證其清潔消毒,，清潔后用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,。

4.取樣袋：可現(xiàn)用酒精進(jìn)行擦拭消毒，再在超凈臺(tái)用紫外燈照射消毒,，（包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒）,。

5.電子稱表面用 75%酒精消毒。

二、人員操作

1.保證手部的清洗,、消毒：取樣前及做樣前都要先洗手再消毒,。

2.取樣要具有代表性（隨機(jī)樣、目的樣,、綜合樣）且要標(biāo)示清楚,。

3.取樣完畢，不可在車間逗留,，要及時(shí)將樣品放入超凈臺(tái),，對其外表面進(jìn)行紫外燈照射消毒。

4.在要求的做樣區(qū)域進(jìn)行操作,。

5.做樣前,，要用 75%酒精棉球?qū)悠反诓窟M(jìn)行擦拭消毒，再開口,。

6.往鹽水瓶加樣品時(shí),，要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。

7.樣品計(jì)量要準(zhǔn)確,，稀釋倍數(shù)也要準(zhǔn)確（1mL 吸管不允許將管口敲掉）,，進(jìn)行 100 倍稀釋時(shí),，1mL 吸管要伸入鹽水中,，不可以將樣品管壁流下去，同時(shí)要避免將管底部捅破,。

8.鹽水溫度以 40℃左右為宜,，不能過熱，將部分微生物燙死,，也不能溫度太低,，不能將奶粉溶解*。

9.進(jìn)行稀釋時(shí),，要搖勻,，保證溶液的均一性。

10.傾倒平皿時(shí),，要注意培養(yǎng)基瓶口不要接觸到平皿,；傾倒的培養(yǎng)基要適量，不可以太少,，在培養(yǎng)過程中干掉,，微生物亦死亡，以 15mL 左右為宜,。

11.做大腸菌群樣時(shí),，要提前將乳糖膽鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)管按需要量備好，放入超凈臺(tái)對外表面進(jìn)行紫外線滅菌。

12.接二步時(shí),，要注意先將接種針（環(huán)）進(jìn)行冷卻,，避免出現(xiàn)接不上菌落的情況發(fā)生，導(dǎo)致無法判斷,、確認(rèn),。

13.做樣完畢，及時(shí)放入相應(yīng)培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),，并清理清潔超凈臺(tái),。

1.在培養(yǎng)過程中，要隨時(shí)監(jiān)控培養(yǎng)箱溫度,，保證其在適宜的溫度進(jìn)行培養(yǎng),。

2.要按照《微生物檢驗(yàn)規(guī)范》要求及時(shí)觀察結(jié)果，出現(xiàn)異常,，要及時(shí)分析原因進(jìn)行反饋,。