細胞破碎技術
破碎方法可規(guī)納為機械法和非機械法兩大類,。
機械法
高壓勻漿破碎法（homogenization）
高壓勻漿器是常用的設備,，它由可產生高壓的正向排代泵（positive displacenemt pump）和排出閥（discharge valve）組成,，排出閥具有狹窄的小孔，其大小可以調節(jié),。細胞漿液通過止逆閥進入泵體內,，在高壓下迫使其在排出閥的小孔中高速沖出，并射向撞擊環(huán)上,，由于突然減壓和高速沖擊,，使細胞受到高的液相剪切力而破碎。在操作方式上,，可以采用單次通過勻漿器或多次循環(huán)通過等方式,，也可連續(xù)操作。為了控制溫度的升高,，可在進口處用干冰調節(jié)溫度,，使出口溫度調節(jié)在20℃左右。在工業(yè)規(guī)模的細胞破碎中,，對于酵母等難破碎的及濃度高或處于生長靜止期的細胞,。
振蕩珠擊破碎法 (Skaking Bead)
將等體積的小量組織樣品與高密度的ZircoBeads放入可密封的2ml螺旋蓋微量管中，再加入緩沖液與穩(wěn)定成份到1.5ml的體積,，用6500RPM振湯機高速上下振動8秒,，休息8秒，再振動8秒即可,。此方法是目前快且一次可處理多樣品的方法,。 一臺機器多可以在一天處理2400支樣品。對小量且多樣的人很方便,。
高速攪拌珠研磨破碎法（fine grinding）
研磨是常用的一種方法，它將細胞懸浮液與玻璃小珠,、石英砂或氧化鋁等研磨劑一起快速攪拌,，使細胞獲得破碎。在工業(yè)規(guī)模的破碎中,，常采用高速珠磨機 ,。
超聲波破碎法（ultrasonication）
超聲波破碎法利用超聲波振蕩器發(fā)射的15-25kHz的超聲波探頭處理細胞懸浮液。 超聲波振蕩器有不同的類型,，常用的為電聲型,，它是由發(fā)生器和換能器組成，發(fā)生器能產生高頻電流,，換能器的作用是把電磁振蕩轉換成機械振動,。超聲波振蕩器以可分為槽式和探頭直接插入介質兩種型式。
撞擊破碎法
非機械法
滲透壓沖擊破碎法（osmotic shock）
滲透壓沖擊是較溫和的一種破碎方法,，將細胞放在高滲透壓的溶液中（如一定濃度的甘油或蔗糖溶液）,，由于滲透壓的作用,，細胞內水分便向外滲出，細胞發(fā)生收縮,，當達到平衡后,，將介質快速稀釋，或將細胞轉入水或緩沖液中,，由于滲透壓的突然變化,，胞外的水迅速滲入胞內，引起細胞快速膨脹而破裂,。
凍融破碎法（freezing and thawing）
將細胞放在低溫下冷凍（約-15℃）,，然后在室溫中融化，反覆多次而達到破壁作用,。由于冷凍,，一方面能使細胞膜的疏水鍵結構破裂，從而增加細胞的親水性能,，另一方面胞內水結晶,，形成冰晶粒，引起細胞膨脹而破裂,。對于細胞壁較脆弱的菌體,，可采用此法。
酶溶破碎法（enzyme lysis）
酶解是利用溶解細胞壁的酶處理菌體細胞,，使細胞壁受到部分或*破壞后,，再利用滲透壓沖擊等方法破壞細胞膜，進一步增大胞內產物的通透性,。溶菌酶（lysozyme)適用于革蘭氏陽性菌細胞的分解,，應用于革蘭氏陰性菌時，需輔以EDTA使之更有效地作用于細胞壁,。 真核細胞的細胞壁不同于原核細胞,，需采用不同的酶。
化學破碎法（chemical treatment）
采用化學法處理可以溶解細胞或抽提胞內組分,。常用酸,、堿、表面活性劑和有機溶劑等化學試劑
去垢劑破碎法（detergents）
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