二氧化碳使用有一定步驟，首先將隨機提供的減壓閥裝在二氧化碳鋼瓶上,，接頭處不得有漏氣現象,，暫不打開鋼瓶。將減壓閥輸出接頭用膠管（可用血壓計上用的外徑φ8,，內徑φ4的橡膠管代用）與CO2箱背后上方的CO2 進氣管接頭接通相連,，用壓緊圈壓緊，以防漏氣,。
     然后用酒精將CO2 箱工作室內擦凈,，在箱體后背打開紫外線燈電源開關，消毒1-2小時,。
再用加水管連接水和箱體左上側加水口（水套式CO2 箱依此操作!）,。
     接下來接通電源，電源開關置“1”,，綠色指示燈亮：
     a. 水套式CO2 箱必須先進行加水操作,，步驟如下所述：

　　打開水，緩慢給水箱加水,，隨水位逐漸升高,，當低水位指示燈滅后，此時再等待3-5秒后停止加水,，此時水位在低,、高水位之間，水位燈均應不亮,，設備可投入運行,。在未加水至高于低水位時,，低水位指示燈亮并有蜂鳴報警聲。如進水過多,，高水位指示燈亮后,，水將從箱體背后溢水口溢出，故當高水位指示燈亮時,，把左下側的放水口橡皮管拉出后拔出放水塞放水（注意：放水橡皮管應向外拉直約300mm左右）,。直至高水位指示燈滅后2-3秒，再把放水塞頭塞緊,。低水位報警時,，應及時加水，否則溫度控制器停止加熱,。

　　b.將溫度設定值調到需要的溫度（例如37℃）,，加熱指示燈（綠）應亮，表示正在加熱,。（注：環(huán)境溫度超出25℃,，可用空調降低環(huán)境溫度。）

　　c.將二氧化碳控制開關置于“0”,。（關閉電磁閥,，因為在未通二氧化碳培養(yǎng)時電磁閥長時間通電會發(fā)熱，影響電磁閥壽命,。）

　　d.待溫度達到設定值后,。將二氧化碳鋼瓶開啟，（開啟前,，減壓閥應盡量擰松,，防止減壓閥輸出壓力過高導致輸氣橡皮管暴裂!）減壓閥上進氣壓力表指示鋼瓶內二氧化碳壓力，緩慢地順時針擰減壓閥旋扭,。使減壓閥輸出壓力指示為0.05Mpa,，指針處于刻度線中間。此時用撥盤設定二氧化碳濃度（出廠時調整為5%）,，開啟二氧化碳控制開關前要關閉空氣流量計和二氧化碳流量計,，二氧化碳控制器顯示“1”，此時即有二氧化碳進入內室,。隨著濃度升高,，二氧化碳控制器顯示出二氧化碳濃度值，到設定值時,，設備自動切換到空氣及二氧化碳補氣狀態(tài),。此時需調整空氣流量計浮子應指示在760ml/min（出廠時已調好），二氧化碳流量計浮子應指示在40ml/min（出廠時已調好）;若浮子偏離上述數值時,，可調節(jié)流量計旋鈕到760 ml/min（空氣）及40ml/min（二氧化碳）準確為止,。（在開,、關箱門后，短時間內空氣流量計無流量,，CO2流量計流量也小于40ml/min這是正?，F象）

　　e. 出廠時一般調整為5%±0.3%二氧化碳濃度，已能滿足廣大用戶的要求,。

　　f.當溫度達到設定值,，波動±0.5℃以內，二氧化碳濃度也達到要求后,即可進行細胞培養(yǎng),。放入水盤,，使?jié)穸确弦蟆?/p>

　　g. 在使用本機或長期不用后使用本機，均應按上述要求操作,，并且在正式培養(yǎng)前應作箱內污染檢查,。