日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

          11684817910 細(xì)胞凋亡試劑盒 年終大促,！  

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

11684817910 細(xì)胞凋亡試劑盒 年終大促！  

3300元 *【】

In Situ Cell Death POD  細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法    

上海索寶*  【】

產(chǎn)品明細(xì)：

 一,、 原理：

TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用來檢測(cè)組織細(xì)胞在凋亡早期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況,。其原理是熒光素（fluorescein）標(biāo)記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT Enzyme）的作用下，可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA的3’-OH末端,，并與連接辣根過氧化酶（HRP,，horse-radish peroxidase）的熒光素抗體特異性結(jié)合,，后者又與HRP底物二氨基聯(lián)苯胺（DAB）反應(yīng)產(chǎn)生很強(qiáng)的顏色反應(yīng)（呈深棕色），特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞,，因而在光學(xué)顯微鏡下即可觀察凋亡細(xì)胞,；由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA斷裂，因而沒有3‘-OH形成,，很少能夠被染色,。本試劑盒適用于組織樣本（石蠟包埋、冰凍和超薄切片）和細(xì)胞樣本（細(xì)胞涂片）在單細(xì)胞水平上的凋亡原位檢測(cè),。還可應(yīng)用于抗腫瘤藥的藥效評(píng)價(jià),，以及通過雙色法確定細(xì)胞死亡類型和分化階段。

二,、 器材與試劑

器材：光學(xué)顯微鏡及其成像系統(tǒng),、小型染色缸、濕盒（塑料飯盒與紗布）,、塑料蓋玻片或封口膜,、吸管、各種規(guī)格的加樣器及槍頭等,；

試劑：試劑盒含TdT 10×,、熒光素標(biāo)記的dUTP 1×、標(biāo)記熒光素抗體的HRP,；自備試劑：PBS,、雙蒸水、二甲苯,、梯度乙醇（100,、95、90,、80、70%）,、DAB工作液（臨用前配制,，5 μl 20×DAB+1μL 30%H2O2+94 μl PBS）、Proteinase K工作液（10-20 μg/ml in 10 mM Tris/HCl,， pH 7.4-8）或細(xì)胞通透液（0.1% Triton X-100 in 0.1% sodium citrate,，臨用前配制）、蘇木素或甲基綠,、DNase 1（3000 U/ml– 3 U/ml in 50 mM Tris-HCl,，pH 7.5， 10 mM MgCl2,，1 mg/ml BSA）等,。

三,、 實(shí)驗(yàn)步驟

操作流程圖：制作石蠟切片→脫蠟、水合→細(xì)胞通透→加TUNEL反應(yīng)液→加converter-POD→與底物DAB反應(yīng)顯色→光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)并拍照,。

具體操作步驟（石蠟包埋切片的檢測(cè)）：

1. 用二甲苯浸洗2次,，每次5min；

2. 用梯度乙醇（100,、95,、90、80,、70%）各浸洗1次,，每次3min；

注：上面兩步是針對(duì)石蠟切片樣本的處理

4. 用Proteinase K工作液處理組織15-30 min 在21–37°C（溫度,、時(shí)間,、濃度均需摸索）或者加細(xì)胞通透液8min；

5. PBS漂洗2次,；

6. 制備TUNEL反應(yīng)混合液,，處理組用50μl TdT+450μl 熒光素標(biāo)記的dUTP液混勻；而陰性對(duì)照組僅加50μl 熒光素標(biāo)記的dUTP液,，陽性對(duì)照組先加入100μl DNase 1,，反應(yīng)在15~25℃×10min，后面步驟同處理組,。

7. 玻片干后,，加50μl TUNEL反應(yīng)混合液（陰性對(duì)照組僅加50μl 熒光素標(biāo)記的dUTP液）于標(biāo)本上，加蓋玻片或封口膜在暗濕盒中反應(yīng)37℃×1h,。

8. PBS漂洗3次,；

9. 可以加1滴PBS在熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞（激發(fā)光波長(zhǎng)為450~500nm，檢測(cè)波長(zhǎng)為515~565nm）,；

10. 玻片干后加50μl converter-POD于標(biāo)本上,，加蓋玻片或封口膜在暗濕盒中反應(yīng)37℃×30min。

11. PBS漂洗3次,；

12. 在組織處加50~100μlDAB底物,，反應(yīng)15~25℃×10min；

13. PBS漂洗3次,；

14. 拍照后再用蘇木素或甲基綠復(fù)染,，幾秒后立即用自來水沖洗。梯度酒精脫水,、二甲苯透明,、中性樹膠封片。

15. 加一滴PBS或甘油在視野下，用光學(xué)顯微鏡觀察凋亡細(xì)胞（共計(jì)200~500個(gè)細(xì)胞）并拍照,?？山Y(jié)合凋亡細(xì)胞形態(tài)特征來綜合判斷（未染色細(xì)胞變小，胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,，晚期出現(xiàn)凋亡小體,，貼壁細(xì)胞出現(xiàn)鄒縮、變圓,、脫落,；而染色細(xì)胞呈現(xiàn)染色質(zhì)濃縮、邊緣化,，核膜裂解,，染色質(zhì)分割成塊狀/凋亡小體）

對(duì)于.培養(yǎng)細(xì)胞的預(yù)處理：
①在載玻片上鋪一層薄薄的多聚賴氨酸（見備注4），干燥后在去離子水中漂洗,，干燥后4℃保存,；
②適當(dāng)方法誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時(shí)設(shè)未經(jīng)誘導(dǎo)的對(duì)照組,，各組離心收集約1×106個(gè)細(xì)胞,，PBS洗一次，重懸,，加到鋪好的多聚賴氨酸載玻片上,，自然干燥，使細(xì)胞很好的吸附到載玻片上,；
③將吸附細(xì)胞的載玻片在4%多聚甲醛（見備注2）中固定25min,；
④PBS浸洗二次，每次5min,；
⑤將吸附細(xì)胞的載玻片在0.2%的Triton X-100（見備注5）中處理5min,；
⑥PBS浸洗二次，每次5min,；

后續(xù)操作如同石蠟包埋切片的6—15

四,、 注意事項(xiàng)

1. 進(jìn)行PBS 清洗時(shí)，每次清洗5 min,。

2. PBS清洗后,，為了各種反應(yīng)的有效進(jìn)行，請(qǐng)盡量除去PBS 溶液后再進(jìn)行下一步反應(yīng),。

3. 在載玻片上的樣本上加上實(shí)驗(yàn)用反應(yīng)液后，請(qǐng)蓋上蓋玻片或保鮮膜,，或在濕盒中進(jìn)行,，這樣可以使反應(yīng)液均勻分布于樣本整體，又可以防止反應(yīng)液干燥造成實(shí)驗(yàn)失敗,。

4. TUNEL反應(yīng)液臨用前配制,，短時(shí)間在冰上保存,。不宜長(zhǎng)期保存，長(zhǎng)期保存會(huì)導(dǎo)酶活性的失活,。

5. 如果20×DAB 溶液顏色變深成為紫色,，則不可使用，需重新配制,。

6. 用甲基綠（Methyl Green）染液（3-5%甲基綠溶于0.1M 醋酸巴比妥 PH4.0）染色后,，請(qǐng)用滅菌蒸餾水清洗多余的甲基綠。然后進(jìn)行洗凈（*乙醇）,、脫水（二甲苯）透明,、封片后通過光學(xué)顯微鏡觀察操作。如果此時(shí)使用80~90%的乙醇洗凈時(shí),，甲基綠比較容易脫色,，注意快速進(jìn)行脫水操作。

7. 熒光素標(biāo)記的dUTP液含甲次酸鹽和二氯鈷等致癌物,，可通過吸入,、口服等途徑進(jìn)入機(jī)體，注意防護(hù),。

8. 試劑保存,；未打開的試劑盒貯存在-20℃（-15~25℃）；converter -POD液一旦解凍,，以后就保存在4℃（2~8℃）下,，至少在6 m內(nèi)穩(wěn)定，避免再次凍存,；TUNEL反應(yīng)液臨用前配好后,，放至冰上直至使用。

9. 結(jié)果分析時(shí)注意：在壞死的晚期階段或在高度增殖/代謝的組織細(xì)胞中可產(chǎn)生大量DNA斷,，從而引起假陽性結(jié)果,；而有些類型的凋亡性細(xì)胞死亡缺乏DNA斷裂或DNA裂解不*，以及細(xì)胞外的矩陣成分阻止TdT進(jìn)入胞內(nèi)反應(yīng),，進(jìn)而產(chǎn)生假陰性結(jié)果,。

羅氏細(xì)胞凋亡試劑盒     

上海索寶*  【】

In Situ Cell Death POD  細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法    

上海索寶*   【】

Shanghai solarbio Bioscience & Technology Co.,LTD

        上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材,、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,，并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心,，以產(chǎn)品為保障,、以誠(chéng)信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長(zhǎng),。

公司組織結(jié)構(gòu)清晰,，內(nèi)部管理科學(xué)，擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊(duì)伍,，保持了各個(gè)部門之間的高效合作運(yùn)轉(zhuǎn),，充分保障了公司在充滿競(jìng)爭(zhēng)的市場(chǎng)中處于地位。公司注重與*合作,，目前公司已經(jīng)和Amersham,、Amresco、Axygen,、BD,、Corning、Dragon,、Eppendorf,、等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系，代理其世界的*產(chǎn)品,，并在全國(guó)各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu),。

我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn),、優(yōu)良的品質(zhì),、充足的庫(kù)存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間,、競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格,，所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù)！

立足北京,，上海,，*，隨著產(chǎn)品營(yíng)銷戰(zhàn)略的不斷延伸,，我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司,。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢(shì)和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,，為中國(guó)生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn),。

為了更好、更全面的發(fā)展,，現(xiàn)公司正在誠(chéng)招各地代理商和招聘若干銷售,、研發(fā)人員，歡迎垂詢并期待您的加入,！

細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒POD法 roche原裝       

上海索寶*  【】

上海索萊寶生物科技有限公司

電  話：      

傳  真：

郵  編：200233

地  址：上海市欽江路15號(hào)14層

郵  箱：solarbio

網(wǎng)  址：www.shsolarbio,。,。ｃｏｍ

 試劑 質(zhì)量放心 價(jià)格低 為中國(guó)生物產(chǎn)業(yè)做貢獻(xiàn)

上海索寶*  【】