目錄:上海索寶生物科技有限公司>>葡聚糖凝膠,，瓊脂糖凝膠填料系列>>凝膠過濾填料-葡聚糖凝膠 G系列>> HA-0240Sephadex G-50 medium 葡聚糖凝膠G-50
葡聚糖凝膠 G-50 Sephadex G-50使用說明
化學和物理性質(zhì)
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,，含有大量的羥基，很容易在水中和電解質(zhì)溶
液中溶脹,。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度,，因此它們的溶脹度和分級分
離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影
響,。
葡聚糖凝膠有不同的粒度,。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要分辨率的柱
色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程,，可在較低的壓力下獲
得較高的流速,。另外，粗級也可用于批量工藝,。
化學穩(wěn)定性
葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑（除非它被化學降解）,。它在水、鹽溶液,、有機
溶劑,、堿和弱酸性溶液中都是穩(wěn)定的，在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解,。長期接觸氧化劑將破壞凝膠,，因而應避免使用。
物理穩(wěn)定性
葡聚糖凝膠并不熔融,，可以在濕態(tài),、中性 PH 進行滅菌或在高壓滅菌器 120
℃、 30 分鐘而不影響它的色譜性質(zhì),。干態(tài)的凝膠加熱至120℃以上將開始焦糖化,。
葡聚糖凝膠的機械強度取決于交聯(lián)度。
產(chǎn)品說明：
產(chǎn) 品 名 稱 分 離 范 圍 應 用
葡聚糖凝膠 G-10 <700 緩沖液交換,、脫鹽,，分離小分子，去除小分子
葡聚糖凝膠 G-15 <1500 緩沖液交換,、脫鹽,，分離小分子，去除小分子
葡聚糖凝膠 G-25 1000-5000 工業(yè)上脫鹽及交換緩沖液
葡聚糖凝膠 G-50 1000-30000 多肽分離,、脫鹽,、清洗生物提取液、分子量測定
葡聚糖凝膠 G-75 2000-70000 蛋白分離純化,、分子量測定,、平衡常數(shù)測定
葡聚糖凝膠 G-100 2000-120000 蛋白分離純化、分子量測定,、平衡常數(shù)測定
葡聚糖凝膠 G-150 5000-300000 蛋白分離純化,、分子量測定,、平衡常數(shù)測定
葡聚糖凝膠 G-200 5000-600000 蛋白分離純化、分子量測定,、平衡常數(shù)測定
使用方法：
1. 乙醇浸泡：
在室溫下,，將干粉浸泡于 50-60%乙醇中至少 24 小時，并不斷攪拌以保證凝膠
溶脹,，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;
2. 無鹽水浸泡：
室溫下,，在無鹽水中充分溶脹 24 小時，間隙攪拌,，以保證凝膠的*溶脹,，
然后；
3. 鹽酸浸泡：
在常溫下再用 0.2N HCl 浸泡 12 小時,，間隙攪拌,，濾干，水洗只中性,；
4. 將溶脹好的凝膠脫氣后（真空抽濾或超聲波）根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),，
注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層,；
5. 上樣前平衡層析柱至少 3-5 個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止（流出液的
PH值等于上柱的 Buffer 的 PH值）,；
6. 凝膠過濾的上樣量一般為 5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在 1-2%的
床體積,，視分離情況可以調(diào)整,；脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關,，柱高控制在 40-50cm 以下,，過高的凝膠層會引起較大
的反壓，應當盡可能避免,。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比
為 5：1 即可,；
7. 洗脫方法：
可以用無鹽水,，也可以采用上柱時的緩沖液洗脫；在上柱 Buffer 中加入 NaCl
等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化,；
8. 在位清洗（CIP）
凝膠使用十次后作一次 CIP,，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。
方法是以 40cm/h 用 1M 氫氧化鈉反向洗四個柱體積,，再以至少三個柱體積平衡
緩沖液再生,。
備注: 其它規(guī)格葡聚糖凝膠處理方法類似。
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