目錄:上海索寶生物科技有限公司>>生化試劑>>實(shí)驗(yàn)室自產(chǎn)產(chǎn)品>> SM0020-50T線粒體提取試劑盒
參考價(jià) | ¥ 400 |
訂貨量 | ≥1盒 |
¥400 |
≥1盒 |
更新時(shí)間:2023-04-27 09:40:46瀏覽次數(shù):2520評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
英文名稱 | mitochondrial extraction kit |
儲(chǔ)存條件 | 四周內(nèi)使用可4℃儲(chǔ)存,,長(zhǎng)期保存請(qǐng)置于-20℃,。冰袋運(yùn)輸 |
規(guī)格 | 50T 100T |
單位 | 盒 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
線粒體提取試劑盒用于從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體,。適合于動(dòng)物軟組織(肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備,。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡,、信號(hào)傳遞,、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。
操作步驟:
1. 樣本處理 a. 組織勻漿:稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟,、腦,、心肌等,PBS或生理鹽水沖洗,,洗凈血水,,濾紙吸干,用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi),。加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer,,0℃冰浴上下研磨組織20次; b. 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿:消化細(xì)胞,,PBS洗滌,,800g離心5~10 min收集細(xì)胞,計(jì)數(shù),。每次提取需要5×107個(gè)細(xì)胞,,加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi),,0℃冰浴研磨30~40次,。
2. 將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到離心管,4℃,,1000g 離心5 min,。
3. 取上清,轉(zhuǎn)移至新的離心管中,,4℃,,1000g再次離心5 min。
4. 取上清,,轉(zhuǎn)移至新的離心管中,,4℃,, 12,000 g 離心10 min。離心后的上清含胞漿成分,,可從中提取胞漿蛋白,。將上清轉(zhuǎn)移到新離心管,線粒體沉淀在管底,。
5. 往線粒體沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重懸線粒體沉淀,,4℃,1000 g 離心5 min,。
6. 取上清,,轉(zhuǎn)移至新的離心管中,4℃,, 12,000 g 離心10 min,。棄上清,高純度的線粒體沉淀在管底,。
7. 用50 -100μL Store Buffer 或合適的反應(yīng)緩沖液重懸線粒體沉淀,,立即使用或-70℃保存。
注意事項(xiàng):
1. 為保證獲得完整的線粒體,,務(wù)必做到:第一,,全程低溫操作;第二,,快速,;第三,在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞,,這是制備線粒體的最關(guān)鍵環(huán)節(jié),。與組織塊相比,培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時(shí)較難破壁,,因而要選用小容量玻璃勻漿器,、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。
2. 以離心力g計(jì)算正確的離心速度,,不同的離心機(jī)可據(jù)此精確計(jì)算離心速度,。3. 進(jìn)行Western Blot和2D-膠電泳,可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體,。 轉(zhuǎn)速與離心力換算: G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2 G為離心力,,一般以g(重力加速度)的倍數(shù)來(lái)表示; [rpm]2即:轉(zhuǎn)速的平方,; R為半徑,單位為厘米,。
備注:以上數(shù)據(jù)均來(lái)自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證, 僅供參考,。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
公司簡(jiǎn)介
上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑,、實(shí)驗(yàn)耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,,并能提供的專業(yè)性生物科技公司,。公司秉承“以客戶為中心,以產(chǎn)品為保障,、以誠(chéng)信為基礎(chǔ),、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長(zhǎng),。公司織結(jié)構(gòu)清晰,,內(nèi)部管理科學(xué),擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊(duì)伍,,保持了各個(gè)部門之間的高效合作運(yùn)轉(zhuǎn),,充分保障了公司在充滿競(jìng)爭(zhēng)的市場(chǎng)中處于地位。公司注重與*合作,,目前已與 Amersham,、Amresco、Axygen,、BD,、Corning、Dragon,、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,,代理其世界的*產(chǎn)品,并在全國(guó)各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu),。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案,。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì),、充足的庫(kù)存,、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格,,所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù),!立足北京,上海,,*,,隨著產(chǎn)品營(yíng)銷戰(zhàn)略的不斷延伸,我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司,。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,,利用各自的資源優(yōu)勢(shì)和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,為中國(guó)生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好,、更全面的發(fā)展,,現(xiàn)公司正在誠(chéng)招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員,,歡迎垂詢并期待您的加入,!
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