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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

線粒體提取試劑盒用于從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體,。適合于動(dòng)物軟組織（肝或腦組織）和硬組織（肌肉）以及培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備,。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細(xì)胞凋亡,、信號(hào)傳遞,、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。

操作步驟：

1. 樣本處理 a. 組織勻漿：稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟,、腦,、心肌等，PBS或生理鹽水沖洗,，洗凈血水,，濾紙吸干，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi),。加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer,，0℃冰浴上下研磨組織20次； b. 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿：消化細(xì)胞,，PBS洗滌,，800g離心5~10 min收集細(xì)胞，計(jì)數(shù),。每次提取需要5×10⁷個(gè)細(xì)胞,，加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi),，0℃冰浴研磨30~40次,。

2. 將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到離心管，4℃,，1000g 離心5 min,。

3. 取上清，轉(zhuǎn)移至新的離心管中,，4℃,，1000g再次離心5 min。

4. 取上清,，轉(zhuǎn)移至新的離心管中,，4℃,， 12,000 g 離心10 min。離心后的上清含胞漿成分,，可從中提取胞漿蛋白,。將上清轉(zhuǎn)移到新離心管，線粒體沉淀在管底,。

5. 往線粒體沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重懸線粒體沉淀,，4℃，1000 g 離心5 min,。

6. 取上清,，轉(zhuǎn)移至新的離心管中，4℃,， 12,000 g 離心10 min,。棄上清，高純度的線粒體沉淀在管底,。

7. 用50 -100μL Store Buffer 或合適的反應(yīng)緩沖液重懸線粒體沉淀,，立即使用或-70℃保存。

注意事項(xiàng)：

1. 為保證獲得完整的線粒體,，務(wù)必做到：第一,，全程低溫操作；第二,，快速,；第三，在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞,，這是制備線粒體的最關(guān)鍵環(huán)節(jié),。與組織塊相比，培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時(shí)較難破壁,，因而要選用小容量玻璃勻漿器,、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。

2. 以離心力g計(jì)算正確的離心速度,，不同的離心機(jī)可據(jù)此精確計(jì)算離心速度,。3. 進(jìn)行Western Blot和2D-膠電泳，可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體,。 轉(zhuǎn)速與離心力換算：     G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]^２ G為離心力,，一般以ｇ（重力加速度）的倍數(shù)來(lái)表示； [rpm]^２即：轉(zhuǎn)速的平方,； R為半徑，單位為厘米,。

備注：以上數(shù)據(jù)均來(lái)自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證, 僅供參考,。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

公司簡(jiǎn)介

上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑,、實(shí)驗(yàn)耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,，并能提供的專業(yè)性生物科技公司,。公司秉承“以客戶為中心，以產(chǎn)品為保障,、以誠(chéng)信為基礎(chǔ),、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念，在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長(zhǎng),。公司織結(jié)構(gòu)清晰,，內(nèi)部管理科學(xué)，擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊(duì)伍,，保持了各個(gè)部門之間的高效合作運(yùn)轉(zhuǎn),，充分保障了公司在充滿競(jìng)爭(zhēng)的市場(chǎng)中處于地位。公司注重與*合作,，目前已與 Amersham,、Amresco、Axygen,、BD,、Corning、Dragon,、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,，代理其世界的*產(chǎn)品，并在全國(guó)各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu),。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案,。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì),、充足的庫(kù)存,、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格,，所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù),！立足北京，上海,，*,，隨著產(chǎn)品營(yíng)銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司,。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,，利用各自的資源優(yōu)勢(shì)和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神，為中國(guó)生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好,、更全面的發(fā)展,，現(xiàn)公司正在誠(chéng)招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員,，歡迎垂詢并期待您的加入,！

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