產(chǎn)品簡介
英文名稱 | Universal RT-PCR Kit(M-MLV) |
別名 | 通用RT-PCR試劑盒(M-MLV) 反轉(zhuǎn)錄試劑盒 |
儲存條件 | -20℃,有效期1年 |
規(guī)格 | 25T 50T 100T |
單位 | 盒 |
本試劑盒適用于各種 RNA制品的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)以及隨后的PCR擴增,。它采用M-MLV進行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),,能夠獲得較長的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。同時,,在20ul反轉(zhuǎn)錄體系和50ul PCR反應(yīng)體系中,,還可以一次性得到足夠量的PCR產(chǎn)物用于后續(xù)的克隆實驗。本試劑盒中配制的酶均為進口的酶,。RT酶采用進口的M-MLV,,所以cDNA更長,基因的信息保留得更完整,!反轉(zhuǎn)錄過程中特異的RNase抑制劑可有效降低由于外源RNase污染而導(dǎo)致實驗失敗的風(fēng)險,。本試劑盒使用方便、快捷,,可廣泛用于cDNA克隆及目的基因檢測等分子生物學(xué)實驗,。
通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)產(chǎn)品簡介
莫洛尼鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MLV RT)是一種RNA依賴的DNA聚合酶,能使mRNA(>5kb)轉(zhuǎn)錄為cDNA,。M-MLV RT的RNase H活性相對于禽成髓細(xì)胞瘤病毒反轉(zhuǎn)錄酶較弱,,更適合用來反轉(zhuǎn)錄較長的mRNA。M-MLV RT應(yīng)用于以RNA為模板合成cDNA的第一條鏈,。
注意:M-MLV RT的延伸性要低于AMV 反轉(zhuǎn)錄酶,,因此要得到和用AMV 反轉(zhuǎn)錄酶一樣產(chǎn)量的cDNA需加入更多單位的M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶。
通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)使用方法
1)使用方法簡介以用2mg總RNA為例,。在無RNase離心管中,,加入0.5mg引物至含總RNA的樣品中,總體積不大于15ml,。70℃,,5分鐘打開模板鏈形成的二級結(jié)構(gòu)。立即放于冰上降溫防止二級結(jié)構(gòu)恢復(fù),,隨后短暫離心使液體集中在離心管底,。
2)加入以下成分到已退火后的引物-模板混合物中,。
注意:不要改變引物的加入比率。
M-MLV 5×Reaction Buffer 5ml
dATP,,10mM 1.25ml
dCTP,,10mM 1.25ml
dGTP,10mM 1.25ml
dTTP,,10mM 1.25ml
Recombinant RNasin Ribonuclease Inhibitor 25 units
M-MLV RT 200 units
無核酸水至最后體積 25ml
3)輕輕混勻離心管,,如果使用隨機引物在37℃孵育60分鐘,其他引物則42℃孵育,。延伸溫度在37~42℃之間最佳,。
4)M-MLV RT 用于合成cDNA的第一鏈。往后的合成則需要根據(jù)需要自行設(shè)計引物再次合成,。
通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)Buffer組成
M-MLV RT 5×Reaction Buffer
250mM Tris-HCl(PH 8.3 室溫下)
375mM KCl
15mM MgCl2
50mM DTT
通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)來源
大腸桿菌表達(dá)純化
通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)保存條件
-20℃保存,。避免經(jīng)常凍融。
備注:以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考,。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
公司簡介
上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑,、實驗耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,,并能提供的專業(yè)性生物科技公司,。公司秉承“以客戶為中心,以產(chǎn)品為保障,、以誠信為基礎(chǔ),、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長,。公司織結(jié)構(gòu)清晰,,內(nèi)部管理科學(xué),擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊伍,,保持了各個部門之間的高效合作運轉(zhuǎn),,充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作,,目前已與 Amersham,、Amresco、Axygen,、BD,、Corning、Dragon,、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,,代理其世界的*產(chǎn)品,并在全國各地設(shè)有分銷機構(gòu),。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實驗技術(shù)解決方案,。豐富的經(jīng)驗,、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存,、準(zhǔn)確的交貨時間,、競爭力的價格,所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù),!立足北京,,上海,*,,隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸,,我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,,利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進取的敬業(yè)精神,為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻,。為了更好,、更全面的發(fā)展,現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售,、研發(fā)人員,,歡迎垂詢并期待您的加入!
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