目錄:上海索寶生物科技有限公司>>生化檢測試劑盒（常量）>>其他系列>> BC3710全蛋白提取試劑盒（強）
| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 50T 100T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BC3710 | 應用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,農(nóng)業(yè),能源,綜合 |
| 儲存條件 | -20℃,，避光,，有效期至少1年 |
| 規(guī)格 | 50T 100T |
| 單位 | 盒 |
全蛋白提取試劑盒（強）用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白,，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,，作用較為強烈,，可快速獲得總蛋白,，可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗,，由于含有上述的酶抑制劑,，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究,。本品僅用于科研。
產(chǎn)品組成:
規(guī)格 | 儲存條件 | |
裂解液（強） | 100 ml | 2-8 oC |
磷酸酶抑制劑（100x） | 1ml | -20 oC |
蛋白酶抑制劑（100x） | 1 ml | |
PMSF（100x） | 1ml |
操作方法:
1,、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑,、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻,，放置在冰上備用,；
稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊,，這個過程注意冰上操作,；
將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min,；
吸取上清至新的管中,；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC,，即用即取,，避免反復凍融，避免長時間儲存,。)
2,、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細胞需要裂解液1ml；
貼壁細胞：棄去培養(yǎng)基,，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS,，然后加入計算好的細胞裂解液,；在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞，
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,，顛倒裂解20-30min
懸浮細胞：4 oC 400g離心收集細胞,，用冷的PBS洗兩次細胞,，同樣按細胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s,，放置冰上裂解10min,，重復3-4次；
裂解完畢之后,，將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min,；
將上清移入新的EP管中；
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗,。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC,，即用即取，避免反復凍融,，避免長時間儲存,。)
注意事項：
實驗過程，所有試劑都要需要預冷或者即融,，保證操作過程中的低溫環(huán)境,；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因為PMSF在水溶液中會快速降解,；
備注：以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考,。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
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