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現(xiàn)貨現(xiàn)貨|BCA法蛋白含量測定試劑盒|酶標(biāo)法

產(chǎn)品簡介：

測定原理

堿性條件下,，蛋白質(zhì)中半胱氨酸,、胱氨酸,、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵，能將Cu2+還原成Cu+,，2分子的BCA與Cu+結(jié)合,，生成紫色絡(luò)合物，在540-595nm有吸收峰,，562nm處吸收峰強,。

試劑組成和配置

試劑A×1瓶，40ml,，4℃保存

試劑B×1瓶 ,，1ml，4℃保存

    5mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白×1支,，-20℃保存

工作液配制：臨用前將試劑A與試劑B按50:1混合,，需要多少，配置多少

標(biāo)準(zhǔn)蛋白配制：取5mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)蛋白,，分別配制0,，25，50,，100,，200，400,，800,，1000μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)濃度蛋白，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線制作,。（先取5mg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白20μl加稀釋液80μl,，即為1000μg/ml，取后者40μl,，加稀釋液10μl,，即為800μg/ml，之后按上一標(biāo)準(zhǔn)液與稀釋液按1:1混合,，即可配制下一標(biāo)準(zhǔn)液,，依次配制400，200,，100,，50，25μg/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白,。）

測定操作

取10μl配置好的標(biāo)準(zhǔn)液與10μl待測液分別加入酶標(biāo)板中,，然后加200μl工作液，充分混勻,，于60℃水浴30min取出后冷卻至室溫,，或室溫放置2h后,，于562nm處測定，記錄吸光值,。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)蛋白濃度,，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取待測液蛋白濃度,。

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