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測(cè)定意義：輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物,、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要?dú)涫荏w，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧,，在合成ATP的同時(shí),，形成大量的ROS，同時(shí)NADH再生為NAD+,。糖,、脂,、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱,。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說(shuō)明細(xì)胞呼吸耗氧量較高,，處于過(guò)氧化狀態(tài)。此外,，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán),。另外，NAD+降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo),、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用,。
測(cè)定原理：分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過(guò)PMS的遞氫作用,，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚,，在570nm下檢測(cè)吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測(cè),。
需自備的儀器和用品：可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī),、移液器,、1 mL玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。