在單細胞水平上，通過光鏡定性檢測細胞凋亡,。

• 敏感：細胞凋亡（細胞染色）標簽的大強度高于缺口翻譯方法
• 快速：使用熒光的dUTP允許后直接TUNEL反應,，但在此之前的二次檢測系統除了對樣品的分析
• 方便：直接標記程序,，使用熒光素-dUTP標記允許在檢測過程中的TUNEL反應效率的核查
• 準確：在分子水平（DNA鏈斷裂）和細胞凋亡的早期階段的細胞識別凋亡鑒定
• 靈活：無基板;提供了選擇的機會,，選擇染色過程

樣品材料：細胞離心涂片和細胞涂片準備,，在幻燈片上生長的貼壁細胞,，冷凍和石蠟包埋的組織切片,。

廣泛使用的方法，以確定細胞凋亡的基因組DNA的瓊脂糖凝膠電泳和DNA段分析基于分析3 H -胸苷,，另外,，5 -溴-2'-脫氧尿苷。該方法涉及從零散,，低分子量的DNA不分段,，高分子量的DNA分離在一個特定的細胞群。因此,，這些方法并不在一個特定的細胞群提供單個細胞的命運的信息,，特別是在組織切片。另外,，個別細胞凋亡可能顯微鏡確認,，因為核染色質凝聚和碎裂的外觀特征，但這種方法是主觀的,，不限于一個相對狹窄的時間窗口時的形態(tài)學變化大的是細胞凋亡的特點是DNA降解,，這是有選擇性的DNA鏈接的internucleosomal地區(qū)處于早期階段。可能產生DNA斷裂雙鏈和單鏈DNA斷裂（尼克斯）,。兩種類型的休息可以自由3'-OH末端修飾核苷酸標記（例如在酶催化反應,，生物素-dUTP標記，地高辛-dUTP標記,，熒光的dUTP）檢測,。末端轉移酶（TDT）催化脫氧模板獨立聚合單和雙鏈DNA的3'-末端。這種方法也被稱為TUNEL法（牛逼 ð ü DT-介導的TP-X的列印 ICK é ND 升abeling）,。另外,，自由3'-OH基團，可使用DNA聚合酶標記通過名為尼克翻譯的模板依賴的機制,。然而,，TUNEL法被認為是更敏感和更快捷,。

1. 酶液（TDT），5瓶
2. 標簽解決方案（熒光的dUTP）,，5瓶
3. 轉換器AP（反熒光抗體AP）,，準備使用的

在原位細胞凋亡檢測試劑盒，AP是基于檢測單和雙鏈DNA斷裂,，細胞凋亡的早期階段發(fā)生的
細胞凋亡是固定的,，透。隨后,，細胞培養(yǎng)與TUNEL反應混合物,，其中包含TDT和熒光的dUTP。在此潛伏期,，末端轉移酶催化熒光的dUTP除了免費單和雙鏈DNA的3'-OH組,。洗滌后，記者酶堿性磷酸酶共軛反熒光抗體標記的DNA受損部位納入標簽,。洗滌除去未結合的酶標記物后,，AP保留在免疫復合物是由底物反應的可視化。

圖1： 示意圖顯示喔那些點點滴滴在原位細胞死亡檢測試劑盒,，AP和POD 的原則