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深低溫保藏細(xì)胞的解凍
深低溫保藏的細(xì)胞十分脆弱,，要輕柔操作,。快速解凍深低溫保藏
的細(xì)胞,，然后直接將其接種到*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,，如果細(xì)胞對(duì)抗
凍劑（DMSO或甘油）特別敏感，則離心除去抗凍劑,，然后將細(xì)胞
接種到*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,。下面是深低溫保藏細(xì)胞的建議解凍步
驟：
直接接種法
1．從凍存管中取出細(xì)胞,，用37℃水浴快速解凍。
2．將細(xì)胞直接接種到*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,。每毫升凍存細(xì)胞需要　
　10-20ml*生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。計(jì)算活細(xì)胞的個(gè)數(shù)。細(xì)胞接種量至
　少要達(dá)到3X105 活細(xì)胞/ml,。
3．將細(xì)胞培養(yǎng)12-24h,。更換新鮮*生長(zhǎng)培養(yǎng)基以去除抗凍劑。
離心法
1．從凍存管中取出細(xì)胞,，用37℃水浴快速解凍,。
2．將1-2ml 凍存細(xì)胞接種到大約25ml*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。要非常
輕柔地進(jìn)行混合,。
3．用大約80 X g的速度離心2-3分鐘,。
4．吸除上清液。
5．用*生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕重懸解離下來的細(xì)胞,，并計(jì)算活細(xì)胞的
個(gè)數(shù),。
6．接種細(xì)胞。細(xì)胞接種量至少要達(dá)到3X105 活細(xì)胞/ml,。