上海索寶梯度PCR儀的原理基于PCR反應(yīng)的溫度敏感性,。 PCR反應(yīng)是一種體外擴增DNA的技術(shù),,通過不斷重復(fù)三個步驟(變性、退火和延伸),,可以在短時間內(nèi)擴增目標DNA序列,。 而PCR反應(yīng)的成功與否,很大程度上取決于反應(yīng)體系中的溫度,。 梯度PCR儀通過在反應(yīng)管中創(chuàng)建溫度梯度,,使得不同溫度下的反應(yīng)條件同時存在。
一次性PCR擴增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀,。 因為被擴增的不同的DNA片段其適合的退火溫度不同,,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的適合退火溫度進行有效的擴增,。
由于傳統(tǒng)的普通PCR儀一次只能運行一個特定的退火溫度,,因此如果要設(shè)置不同的退火溫度,那么就需要多次運行才能夠?qū)崿F(xiàn),,這一過程需要花費大量的時間,。 而梯度PCR儀以此就可以實現(xiàn)多個不同的退火溫度,這樣可以節(jié)約時間,,在效率的提升方面就非常明顯了,,這樣既節(jié)約時間,也節(jié)約成本,。 因此從功能和特性上來說,,梯度PCR儀的性能是要優(yōu)于普通PCR儀,而且在不設(shè)置梯度的情況下梯度PCR儀也可當做普通的PCR用,,非常方便,。
可以把一次PCR擴增實驗設(shè)置成一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度)的實驗,這樣的儀器就叫梯度PCR儀,。 設(shè)置梯度的主要原因是因為被擴增的不同DNA片段,,其最適退火溫度不同,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增,,從而一次性PCR反應(yīng)就可以篩選出表達量最高的最適退火溫度,,優(yōu)化實驗,,進行有效的擴增。 梯度PCR儀主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,,在節(jié)約成本的同時也節(jié)約了時間,。
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