土壤蔗糖酶(S-SC)能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收,，其酶促作用產(chǎn)物與土壤中有機(jī)質(zhì),、氮、磷含量,，微生物數(shù)量及土壤呼吸強(qiáng)度密切關(guān),，是評價土壤肥力的重要指標(biāo)。
土壤蔗糖酶測試盒測定原理：
S-SC催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,，進(jìn)一步與3,，5-二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物,，在510nm有特征光吸收,，在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與S-SC活性成正比。
操作步驟:
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,，不得用于人體臨床直接檢測,。實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,，如樣品濃度過高時,，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘,。為保證實驗結(jié)果有效性,，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
2. 棄去液體,，甩干，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),，酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘,，大約400μl/每孔，甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘,，350μl/每孔，甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng),，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液,。
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