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食品中蘇丹紅染料的檢測方法優(yōu)化(辣椒油)
蘇丹紅屬偶氮系列化工合成染料,并非食品添加劑,,主要包括Ⅰ,、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四種類型,。對于食品中蘇丹紅的檢測,,我國曾發(fā)布 GB/T 19681-2005 食品中蘇丹紅染料的檢測方法 液相色譜法 國家標(biāo)準(zhǔn)。樣品經(jīng)溶劑提取,、固相萃取凈化后,,用反相液相色譜—紫外可見光檢測器進行色譜分析,采用外標(biāo)法定量,。
方法優(yōu)勢
辣椒油樣品經(jīng)乙腈提取后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干,,正己烷溶解,然后使用ProElut SDH 蘇丹紅檢測固相萃取柱進行凈化,,液相色譜法檢測,。該方法參考國標(biāo)方法進行樣品提取,凈化過程使用商品化的蘇丹紅檢測固相萃取柱,,無需按照國標(biāo)方法進行層析柱的填裝和中性氧化鋁的活度調(diào)整,,避免了中性氧化鋁活度容易受環(huán)境影響而引起蘇丹紅回收率不穩(wěn)定的弊端,使用ProElut SDH 蘇丹紅固相萃取柱重現(xiàn)性和回收率結(jié)果更加穩(wěn)定可靠,。方法檢出限滿足國標(biāo)GB/T 19681-2005要求zui低檢出限10 μg /kg,。
以下為詳細解決方案,,敬請參考!
1,、適用范圍
適用于辣椒油中蘇丹紅Ⅰ,、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ和蘇丹紅Ⅳ的檢測,,方法檢出限是10 μg /kg,。
2、提取
(1) 取0.5 g樣品與10 mL乙腈混合,,振蕩5 min,,超聲提取5 min,8000 rpm下離心2 min,,收集上清液,;
(2) 將下層殘留物依次用10 mL、10 mL乙腈按照步驟(1)重復(fù)提取兩次,,合并三次上清液,;
(3) 將上清液在40℃水浴條件下,減壓蒸至近干,,再加入5 mL正己烷混勻,,待凈化。
3,、SPE柱凈化——ProElut SDH 6 mL(Cat.#65909)
a活 化: | 5 mL正己烷活化,; |
b上 樣: | 加入待凈化液,棄去流出液,; |
c淋 洗: | 依次加入5 mL正己烷,5 mL 1%乙酸乙酯正己烷,,棄去流出液,; |
d洗 脫: | 加入10 mL 30%乙酸乙酯正己烷,收集流出液,; |
e重新溶解: | 將洗脫液在40 ℃下減壓蒸餾近干,,用40%甲基叔丁基醚正己烷溶液定容至1 mL,供HPLC分析,。 |
4,、色譜條件
色譜柱:Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm(Cat# 99603)
流 速:1.0 mL/min
進樣量:20 μL
柱 溫:40 ℃
檢測器:PDA 518 nm
流動相:A:0. 2% 磷酸水溶液 B:乙腈
梯度設(shè)置
時間/Min. | 0 | 18 | 20 | 30 | 30.1 | 40 |
A(%) | 12 | 12 | 0 | 0 | 12 | 12 |
B(%) | 88 | 88 | 100 | 100 | 88 | 88 |
5、添加回收結(jié)果
辣椒油中蘇丹紅的HPLC檢測添加回收結(jié)果
分析物 | 添加水平(mg/kg) | 回收率(%) |
蘇丹紅Ⅰ | 1.0 | 95.16 |
蘇丹紅Ⅱ | 1.0 | 91.07 |
蘇丹紅Ⅲ | 1.0 | 93.88 |
蘇丹紅Ⅳ | 1.0 | 91.83 |
辣椒油中蘇丹紅染料的測定相關(guān)產(chǎn)品信息:
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
樣品前處理 | ||
65909 | 蘇丹紅檢測固相萃取柱 ProElut SDH | 6 mL, 30/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵,,無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
37177 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
37180 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
色譜柱及保護柱 | ||
99603 | 反相液相色譜柱 Diamonsil C18(2) | 250 × 4.6 mm,,5 μm |
6201 | EasyGuard C18 保護柱套裝 | 10 × 4.0 1個柱套 + 2個柱芯 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | ||
50P-C16986101 | 蘇丹紅Ⅰ[842-07-9] | 250 mg |
50P-C16986102 | 蘇丹紅Ⅱ[3118-97-6] | 250 mg |
50P-C16986103 | 蘇丹紅Ⅲ[85-86-9] | 250 mg |
50P-C16986104 | 蘇丹紅Ⅳ[85-83-6] | 250 mg |
HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50115 | 正己烷 HPLC級 | 4 L |
50104 | 乙酸乙酯 HPLC級 | 4 L |
50123 | 甲基叔丁基醚 HPLC級 | 4 L |
50133 | 磷酸 HPLC級 | 50 mL |
通用色譜產(chǎn)品 | ||
52401B | 瓶架/藍色 | 50 孔 |
52401A | 瓶架/白色 | 50孔 |
5323 | 樣品瓶(棕色/螺紋) | 2 mL, 100/pk |
5325 | 樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝) | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |