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液相色譜柱的正確存放方式
液相色譜柱的正確存放方式是確保其性能穩(wěn)定,、延長使用壽命的關(guān)鍵,。不當(dāng)?shù)拇娣趴赡軐?dǎo)致柱效下降、固定相損傷或污染,，甚至造成不可逆的損壞,。以下是關(guān)于液相色譜柱存放的詳細指南,，涵蓋操作步驟、環(huán)境要求及注意事項,。
一,、使用后的預(yù)處理
1. 沖洗色譜柱
- 目的：清除殘留樣品、緩沖鹽,、雜質(zhì)或腐蝕性溶劑,，防止析出結(jié)晶或滋生微生物。
- 操作：
- 反相柱(C18等)：先用純水沖洗10-15倍柱體積,，再用甲醇或乙腈置換水分,，最終保存于有機相(如甲醇:水=1:1或純有機溶劑)。
- 正相柱(硅膠,、氨基柱等)：用正己烷或異丙醇沖洗,，避免接觸水分。
- 離子交換柱：用高純度水或低濃度鹽溶液沖洗,，去除高鹽緩沖液,。
- 注意：沖洗流速需低于分析流速(如0.5 mL/min)，避免壓力沖擊損傷填料,。
2. 排除氣泡并封端處理
- 沖洗后,，用封端溶劑(如0.05% TFA或醋酸)低速沖洗，封閉硅膠表面殘余硅羥基,，減少堿性物質(zhì)吸附。
- 排出柱內(nèi)氣泡,，確保填料浸潤溶劑,。
二、存放環(huán)境要求
1. 溫度控制
- 理想溫度：4-30℃(避免凍結(jié)或高溫導(dǎo)致填料收縮/膨脹),。
- 長期存放時,，建議冷藏(如4℃)，但需防止冷凍(水相可能結(jié)冰脹裂柱子),。
2. 濕度與避光
- 環(huán)境濕度≤60%RH,，避免潮濕導(dǎo)致金屬接頭銹蝕或霉菌生長。
- 避光保存,，防止光照引發(fā)溶劑分解或固定相結(jié)構(gòu)變化,。
3. 防震與防塵
- 平放于穩(wěn)定臺面，避免垂直放置(重力可能導(dǎo)致填料沉降),。
- 使用柱套或保鮮膜包裹柱子,，防止灰塵污染接頭。
三,、密封與溶劑保護
1. 溶劑選擇原則
- 反相柱：保存于甲醇,、乙腈或甲醇:水(1:1)混合液中,，避免純水導(dǎo)致填料塌陷。
- 正相柱：用正己烷,、異丙醇等非極性溶劑密封,，嚴禁接觸水分。
- 特殊柱(如手性柱,、生物酶柱)：遵循廠商推薦的專用保存液(如含疊氮鈉的緩沖液),。
2. 密封方式
- 安裝柱堵頭或封口螺帽，確保柱床與外界隔絕,。
- 若短期存放(<1周),，可保留流動相并密封兩端；長期存放需更換新鮮溶劑,。
3. 溶劑揮發(fā)預(yù)防
- 使用高純度,、低揮發(fā)性的溶劑(如色譜純甲醇)，定期檢查液面,，避免填料干燥,。
- 揮發(fā)性溶劑(如乙酸乙酯)需密封后置于陰涼處。
四,、物理保護與標(biāo)簽管理
1. 防壓防彎
- 禁止堆放重物或擠壓柱子,，避免柱管變形導(dǎo)致流型紊亂。
- 搬運時輕拿輕放,，防止碰撞接頭,。
2. 標(biāo)簽與記錄
- 標(biāo)明柱子型號、填料類型,、保存溶劑及存放日期,，便于快速識別。
- 記錄使用次數(shù),、最后一次沖洗溶劑及保存狀態(tài),，用于追蹤性能變化。
五,、特殊情況處理
1. 蛋白或生物樣品殘留
- 用0.5% SDS或尿素溶液沖洗,，再依次用高濃度有機溶劑和水交替沖洗，去除蛋白質(zhì),。
2. 強酸性/堿性溶劑污染
- 立即用中性溶劑(如甲醇)充分沖洗,，避免長時間接觸pH環(huán)境。
3. 鹽析堵塞
- 用熱水(60℃以下)或稀硝酸沖洗溶解無機鹽,，隨后用純水和有機溶劑置換,。
六、重啟使用前的準(zhǔn)備工作
1. 平衡柱子
- 安裝后,，用保存溶劑以低流速(0.2-0.5 mL/min)沖洗15-30分鐘,，排空氣泡并恢復(fù)柱溫,。
2. 梯度測試
- 進行空白梯度測試(如甲醇-水梯度)，檢查基線平穩(wěn)性和保留時間重現(xiàn)性,，確認柱效正常,。