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免疫親和柱的特點及條件優(yōu)化要怎么做

時間:2022-5-9 閱讀:2329
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   免疫親和柱基于抗原抗體反應(yīng),特異性抗體連接在柱體內(nèi),,選擇性吸附樣品中的待檢物,,雜質(zhì)不被吸附,流出柱外,,柱上結(jié)合的目標(biāo)物再被特定的洗脫液洗下來,,可以用于液相色譜分析或者ELISA含量測定,是一種高效的前處理柱,。
 
  免疫親和柱的特點:
  1,、采用單克隆免疫技術(shù),可以有效性地將待測成分分離出來,,分離效率和回收率高,,正確性和可靠性強。
 
  2,、實驗穩(wěn)定性好,,重復(fù)性強。
 
  3,、純化過程簡單快速,,短時間即可處理大量樣品。
 
  4,、實驗設(shè)備輕便,,自動化程度高,操作簡單,,對實驗人員要求不高,,可在小型試驗場所使用。
 
  5,、無需有毒溶劑,,實驗過程安全可靠。
 
  6,、應(yīng)用范圍廣,,可處理多種復(fù)雜樣品。
 

免疫親和柱

 

  免疫親和柱的條件優(yōu)化要怎么做:
  選擇小柱:根據(jù)基質(zhì)樣品和目標(biāo)物選擇合適的SP小柱,。
 
  活化平衡:活化溶液可以濕潤填料,,滲透鍵合相,消除填料雜質(zhì),,通常和洗脫液一致平衡溶液一般和上樣液接近,從活化溶液過度到上樣液,減少上樣回收率損失,。
 
  上樣:將提取溶液加入到小柱上,,一般需控制流速在1-2滴/秒。
 
  淋洗:使用與上樣溶液相同或接近性質(zhì)的溶液沖洗不需要的雜質(zhì),。
 
  洗脫:合適的洗脫溶劑將目標(biāo)物洗脫下來,。
 
  小貼士:
  真菌毒素危害極大,應(yīng)戴手套操作,。
 
  不要使用過了有效日期的,。
 
  洗脫液可以直接使用色譜級甲醇洗脫,但可能會降低回收率,。
 
  多毒素檢測中,,嘔吐毒素因為是水溶性,過柱操作時對有機(jī)溶劑耐受性低,,所以組合中包含有嘔吐毒素的前處理方法會相應(yīng)復(fù)雜一些,,前處理方法基本一致。

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