在日常分離分析工作中,，色譜柱的正確使用和維護十分重要,，色譜柱使用是否得當，直接影響色譜柱的壽命,，稍有不慎就會降低柱效,、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,，需要注意下列問題,，以維護色譜柱。
 

　　(1)柱子在裝卸,、更換時,，動作要輕，接頭擰緊要適度,。必須防止較強的機械振動,，以免柱床產(chǎn)生空隙。

　　(2)如果用來做常規(guī)分析,，樣品種類有限,，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根柱,，這樣有助于延長柱子的壽命,。

　　(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行,，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。

　　(4)應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,，特別是反相色譜中,，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/p>

　　(5)如使用柱溫控制裝置時,，應(yīng)注意在通入流動相后才能升溫,。

　　(6)一般說來色譜柱不能反沖,，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),。否則反沖會輕則降低柱效,，重則填料流失，色譜柱損壞,。

　　(7)選擇使用適宜的流動相,，以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一個保護柱,，保護柱填料要與色譜柱保持一致,，可使流動相在進入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解,。

　　(8)避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi),，需要對樣品進行預(yù)處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱,。保護柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換,。

　　(9)經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),。在進行清洗時,，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,。

　　(10)保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,，防止長菌。柱接頭要擰緊,，防止溶劑揮發(fā)干燥,，禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。

　　(11)色譜柱使用過程中,，如果壓力升高,，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗;另一種可能是大分子進入柱內(nèi),，使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大,。

　　(12)在完成分離分析工作之后,，不應(yīng)立即停機，需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗,，以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì),。