1,、在條件允許情況下，在使用前對新色譜柱按照說明書方法進行柱效測試,。以確保色譜柱的正常,。

2、所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于60℃,。

3,、樣品

將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中,。樣品溶液不應含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾,。樣品溶液如果使用強溶劑（例如,，流動相為水，樣品溶劑為甲醇）,，為達到較好峰形,，需要降低進樣量（以250x4.6mm規(guī)格為例，小于10μL）,。

4,、流動相

所有流動相,，特別是含有緩沖鹽的流動相，當日實驗當日配制,；如果使用了前日配制的流動相,，請確保流動相pH值沒有變化，并確保流動相沒有長菌,。 流動相的pH值取決于您的應用和色譜柱填料類型,。我們建議在所有的色譜柱盡量在pH2~8范圍內使用。請盡量避免在常規(guī)流動相中使用很高比例的水（>95%）作為流動相,，可能會造成保留時間的不穩(wěn)定或者色譜柱鍵合相的損害,。如果使用高比例水或者100%水相為流動相，建議使用親水柱,。

5,、色譜柱平衡

在進行分析之前,，請使用至少20倍柱體積的流動相沖洗色譜柱,，以使色譜柱達到平衡。

色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算：

V=0.68πr2

V為色譜柱柱體積（mL）,，r為色譜柱內徑（cm）,，L為色譜柱長度（cm）。

6,、色譜柱保護

對于“臟”的樣品以及組分未知的樣品,，請盡量使用在線濾器或保護柱，如果可能,，使用SPE小柱對樣品進行前處理是更好的選擇,。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。

7,、色譜柱清洗

在儲存色譜柱之前,，請使用至少20倍柱體積的不帶緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱（去除緩沖鹽），再用更強的溶劑沖洗色譜柱（去除強保留成分,，反相色譜通常使用甲醇或乙腈）,，然后使用合適的溶劑儲存色譜柱。

8,、 色譜柱保存

反相色譜柱,，保存溶劑通常是含至少30% 有機相的水溶液，也可在常規(guī)清洗后直接保存在有機相中,。

如果需要長時間儲藏,，則需要使用較高比例的有機相（有機相比例至少大于50%）。