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接上期我們繼續(xù)來讀一讀顯微物鏡。把物鏡裝到顯微鏡上，需要匹配螺紋標(biāo)準(zhǔn),，在行業(yè)內(nèi)很長一段時間物鏡的螺紋標(biāo)準(zhǔn)RMS(Royal Microscopical Society),，提高不同廠家物鏡之間的通用性。比如Olympus的大部分物鏡都是RMS螺紋標(biāo)準(zhǔn)的,，也有其他廠家采用M25/M32這樣的標(biāo)準(zhǔn),。相對應(yīng)地，物鏡還有一個參數(shù)是齊焦距離(Parfocal Distance, 參看下圖),，齊焦的通俗理解是當(dāng)物鏡從10倍換到20倍40倍的時候,，樣品還保持在相同的焦面上。齊焦距離的標(biāo)準(zhǔn)有45mm和60mm,，不同廠家有不同的設(shè)計考慮。

工作距離(Working Distance)對于物鏡來說是一個非常重要的參數(shù),，上期我們在物鏡上有讀到“WD 0.21”這樣的標(biāo)識,，代表工作距離是0.21mm。在生命科學(xué)的應(yīng)用中,，對于物鏡的工作距離需求是有很大變化的,。在細胞房或者樣品器皿的底部相對較厚(>1mm)的時候，長工作距離的物鏡就非常有必要,，比如LUCPLFLN40XPH這個物鏡,，工作距離可以在3.0-4.2mm之間調(diào)節(jié)，比如UPLSAPO40X2這個高分辨率物鏡,，工作距離只有0.18mm,。所以我們在選擇物鏡的時候，一定需要明確使用場景,，對于工作距離的需求,。

數(shù)值孔徑(Numerical Aperture即NA)，上面提到的兩個40倍物鏡,，工作距離差別很大,，同時對應(yīng)的數(shù)值孔徑也不一樣（NA 0.95和NA 0.6）。物鏡的光學(xué)分辨率和NA正好成反比,，一般分辨率的公式是d = 0.61*wavelength / NA,，也就是說NA越大物鏡分辨率越高。下圖是兩種不同物鏡（干鏡和油鏡）的收集光線角度的描述說明,，可以看到油鏡的收光角度很大,，由于NA=n*sin(θ)，其中n是空氣或者油的折射率,，收光角度越大那么NA越大,。所以這就是為什么油鏡的分辨率都比干鏡的分辨率更高。

放大倍數(shù)(Magnification)，大部分同學(xué)可能覺得放大倍數(shù)是容易理解的,，物鏡上標(biāo)注幾倍那就是幾倍了,。其實這并不*準(zhǔn)確，比如把Olympus物鏡裝在Nikon顯微鏡上,，標(biāo)注是20倍的物鏡其實終的放大倍數(shù)并不是20倍,。這是為什么呢？現(xiàn)在所有科研級物鏡都已經(jīng)是無限遠光學(xué)系統(tǒng)校準(zhǔn)的,，要實現(xiàn)成像功能,，物鏡還需要搭配一塊Tube Lens才能真正出來圖像。所以物鏡的真實放大倍數(shù)=Tube Lens焦距/物鏡焦距,，對于不同廠家,，Tube Lens焦距是不一樣的比如Olympus是180mm而Nikon則是200mm。這樣的話,，20倍Olympus物鏡裝到Nikon顯微鏡上,，真實的放大倍數(shù)是22.2倍。下圖解釋說明了無限遠物鏡成像系統(tǒng),。

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