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寨卡病毒（IgM抗體）酶聯(lián)診斷試劑盒

【產(chǎn)品名稱】
中文名稱：寨卡病毒IgM檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Zika virus IgM micro-capture ELISA

【規(guī)格】
96T

【預(yù)期用途】
寨卡病毒IgM抗體酶聯(lián)診斷試劑盒用于人血清或血漿（檸檬酸,、肝素）中抗寨卡病毒IgM抗體的定性檢測(cè),。

【前言簡(jiǎn)介】
寨卡病毒是一種單鏈RNA病毒，屬黃病毒科家族（黃病毒屬）,。它于1947年在烏干達(dá)的寨卡森林進(jìn)行黃熱病研究中從一只恒河猴身上*分離出來(lái),。自從被發(fā)現(xiàn)后，寨卡病毒被發(fā)現(xiàn)在在非洲和亞洲流行,。2007年寨卡病毒被報(bào)道出現(xiàn)在雅浦島,、密克羅尼西亞群島上，這意味著寨卡病毒已傳播出非洲和亞洲,。自2003年以來(lái),，法屬波利尼西亞、新加勒多尼亞,、庫(kù)克群島,、復(fù)活節(jié)島（智利）、薩摩亞和瓦努阿圖等均有寨卡病毒的出現(xiàn),，在2015年初期,，它開(kāi)始蔓延至巴西和美洲的其他國(guó)家。

寨卡病毒主要是靠受感染的伊蚊類蚊子叮咬進(jìn)行傳播的,，然而一些不太常見(jiàn)的傳播模式如血液傳播,、母嬰傳播及性接觸等均有報(bào)道。

寨卡病毒的潛伏期目前還不太清楚,，但有可能是幾天,。句估計(jì)，大約只有五分之一的寨卡病毒感染者出現(xiàn)的相應(yīng)的體征和癥狀,。被寨卡病毒感染后出現(xiàn)的臨床與登革熱和基孔肯雅熱出的臨床表現(xiàn)類似,，但是通常比較溫和。zui常見(jiàn)的臨床癥狀為斑丘疹,、低燒,、關(guān)節(jié)痛、肌痛,、頭痛和結(jié)膜炎,，少部分會(huì)出現(xiàn)水腫、喉嚨痛咳嗽,、嘔吐等。

人類感染的寨卡病毒傳染病通常是溫和的且是自限的,。通常在3-7天后氣臨床癥狀會(huì)自行緩解,，關(guān)節(jié)痛可能或持續(xù)一個(gè)月,。在極少數(shù)的情況下，寨卡病毒感染的吉蘭--巴雷綜合征,，可能會(huì)引起周圍神經(jīng)的紊亂,。此外在懷孕期間感染寨卡病毒有可能引起胎兒先天性顱腦畸形。

主要檢測(cè)方法：
1. 細(xì)胞培養(yǎng)分離
2. PCR
3. 血清學(xué)：IF,、ELISA
4. 蝕斑減少中和試驗(yàn)（PRNT）

【檢測(cè)原理】
寨卡病毒IgM抗體酶聯(lián)診斷試劑盒采用酶聯(lián)免疫法中的μ鏈捕獲法技術(shù),。樣本中的抗體與微孔板包被的抗人IgM抗體結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的部分,，然后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的寨卡病毒抗原,，該酶聯(lián)物捕獲特異性的IgM抗體，在經(jīng)第二次洗滌除去未結(jié)合的酶聯(lián)物,，加入底物液后產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,，產(chǎn)物的顏色強(qiáng)度與樣本中IgM抗體的量成正比。隨后加入終止液終止反應(yīng),，并在450/620 nm處讀取吸光度,。

【試劑盒組成】
包被板MTP               12×8
包被有抗人IgM抗體。
酶聯(lián)物ENZCONJ          1×15mL
HPR標(biāo)記的寨卡病毒,，紅色,，黑蓋，即用型
IgM陽(yáng)性質(zhì)控CONTROL +    1×2mL
人血清或血漿,，黃色,，紅蓋，即用型
IgM陰性質(zhì)控CONTROL -     1×2mL
人血清或血漿,，黃色,，藍(lán)蓋，即用型
IgM臨界質(zhì)控CONTROL CO   1×3mL
人血清或血漿,，黃色,，綠蓋，即用型
樣本稀釋液SAMPLEDIL      1×100mL
磷酸鹽緩沖液（10 mM）,，pH 7.2 ± 0.2,，黃色，白蓋，即用型
洗滌液（20×）WASHBUF CONC   1×50mL
磷酸鹽緩沖液(0.2 M),， pH 7.2 ± 0.2,，白蓋
TMB底物液TMB SUBS  1×15mL
黃蓋，即用型
終止液TMB STOP  1×15mL
0.2 mol/L的硫酸,，紅蓋,，即用型
封板紙  1張

實(shí)驗(yàn)所需材料（未提供）
1. 酶標(biāo)儀
2. 37 °C保溫箱
3. 手動(dòng)或全自動(dòng)洗板設(shè)備
4. 10-1000μL的移液器
5. 漩渦振蕩器
6. 蒸餾水
7. 一次性試管

【儲(chǔ)存及效期】
將寨卡病毒IgM抗體酶聯(lián)診斷試劑盒置于2 - 8 °C條件下。已經(jīng)開(kāi)啟過(guò)的試劑于2 - 8 °C下可保存至標(biāo)簽上的效期,。

【樣本要求】
血清,、血漿（檸檬酸、肝素）樣本在2 - 8 °C下可保存5天,，如要保存更長(zhǎng)時(shí)間,，則需分裝凍存至-70 - -20°C。使用前解凍并充分混勻,。避免反復(fù)凍融,。建議不要使用熱滅活樣本。

【檢測(cè)方法】
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將所有試劑和樣本平衡至室溫,。

試劑準(zhǔn)備
洗滌液：用蒸餾水按1:19進(jìn)行稀釋,，例如：10mL濃縮洗滌液 + 190mL蒸餾水，充分混勻,。配制好的洗滌液在室溫下（2 0- 25 °C）可存放5天,。若濃縮液中含有晶體，可放在37 °C條件下使其充分溶解后再進(jìn)行稀釋,。

樣本準(zhǔn)備：實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,，所有樣本均按1:100的比例用樣本稀釋液進(jìn)行稀釋。
如：10 μL樣本+1mL的樣本稀釋液,，充分混勻,。

檢測(cè)步驟（詳詢）


結(jié)果判定

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
特異性：98.5 %
靈敏度：100 %
局限性：細(xì)菌污染或反復(fù)凍融會(huì)影響樣本的吸光度,。

【注意事項(xiàng)】

• 寨卡病毒IgM抗體酶聯(lián)診斷試劑盒僅供體外診斷和專業(yè)人士使用。

• 在檢測(cè)開(kāi)始之前,，仔細(xì)和完整的閱讀說(shuō)明書(shū),，使用試劑盒提供的說(shuō)明書(shū)的有效版本,，確保所有的程序都清楚。

• 如果試劑盒有破壞的請(qǐng)與IBL公司或是提交您的投訴單,，但自您拿到試劑盒后zui遲不超過(guò)一個(gè)星期,。在檢測(cè)時(shí)請(qǐng)不要使用受損的試劑，并妥善保管好以備投訴時(shí)使用,。

• 按照批號(hào)和有效期，不要混合使用不同批號(hào)的試劑,，也不要使用過(guò)期的試劑,。

• 遵守實(shí)驗(yàn)室優(yōu)化管理規(guī)則和安全指南，穿實(shí)驗(yàn)服,，帶橡皮手套,，有必要時(shí)請(qǐng)戴護(hù)目鏡。

• 這種試劑盒中含有會(huì)傷害眼睛和皮膚的有害試劑,，請(qǐng)閱讀材料來(lái)源和標(biāo)簽獲取詳細(xì)信息,。產(chǎn)品的材料安全數(shù)據(jù)能夠從IBL公司主頁(yè)上載可直接咨詢IBL公司獲取。

• 根據(jù)國(guó)家生物有害物質(zhì)及安全條例,，所有化學(xué)藥品和準(zhǔn)備或使用過(guò)的試劑都應(yīng)當(dāng)做有害物質(zhì)進(jìn)行處理,。

• 避免接觸終止液，以免刺激或灼燒皮膚,。

• 試劑盒中部分試劑含有*作為防腐劑,，一旦與皮膚或者眼睛發(fā)生接觸，立即用大量清水沖洗. *可能會(huì)與鉛和銅的管道發(fā)生反應(yīng),，形成爆炸性的金屬疊氮化物,。當(dāng)處理試劑時(shí)，使用大量水沖洗以防止疊氮化物的形成,。

• 試劑盒中的所有試劑包括檢測(cè)過(guò)的人血清/血漿對(duì)HIV/II,，HbsAg和HCV都表現(xiàn)為陰性，但是試劑中會(huì)出現(xiàn)此類病毒（HIV/II,，HbsAg和HCV）或其他具有感染性的病原體的可能性都不能*被排除,。因此，所有的試劑在使用和處理的過(guò)程中都應(yīng)當(dāng)作潛在生物有害物質(zhì)進(jìn)行處理,。

操作注意事項(xiàng)
1. 樣品的不合理處理及實(shí)驗(yàn)操作的任何改動(dòng)都將影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,。取樣體積、溫育時(shí)間,、預(yù)處理步驟都必須嚴(yán)格按說(shuō)明進(jìn)行,。只能使用標(biāo)準(zhǔn)取樣器和標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。

2. 一旦實(shí)驗(yàn)開(kāi)始,，所有的步驟都必須完整的進(jìn)行下去,，不允許中斷,。在使用前，將所有試劑和樣品都平衡至室溫（18-25℃）,，輕輕搖動(dòng)液體試劑和樣品,，試劑混合過(guò)程中要避免氣泡。

3. 避免污染試劑,、取樣器,、微孔/試管。加試劑和樣本時(shí),，請(qǐng)使用新的取樣吸頭,。不要交換瓶蓋。蓋好不使用的試劑,。不要重復(fù)使用微孔/試管或者試劑,。

4. 溫育時(shí)間會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。微孔加樣的順序和時(shí)間都必須*,。建議使用8孔微量取樣器給微孔加樣,。

5. 微孔板的清洗非常重要，微孔清洗不好將會(huì)形成錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。建議使用多孔取樣器或自動(dòng)微孔清洗設(shè)備進(jìn)行清洗,。每次溫育間隔期間要避免微孔干燥。加洗滌液和吸液時(shí)要避免碰到微孔,。清洗和加試劑時(shí)都應(yīng)特別小心,。清洗時(shí)，在微孔中精確的加入洗滌液緩沖液,，同時(shí)確保微孔中無(wú)殘?jiān)?br/>
6. 濕度會(huì)影響微孔板,，所以在未到達(dá)室溫時(shí)請(qǐng)勿打開(kāi)包裝，未使用的微孔板要重新密封于裝有干燥劑的包裝袋中,。

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