人半乳糖凝集素3檢測試劑盒（ELISA法）

產(chǎn)品詳情

預(yù)期用途
人半乳糖凝集素3檢測試劑盒可用于人血清,，血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中半乳糖凝集素3的定量檢測。僅用于科研使用,。

檢測原理

人半乳糖凝集素3ELISA檢測試劑盒,，使用包被有人Galectin-3特異性抗體的96孔板。將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加入到孔中,，樣品中存在的Galectin-3通過固定的抗體與板孔結(jié)合,。洗滌板孔并加入生物素化的抗人Galectin-3抗體， 洗去未結(jié)合的生物素化抗體后,，將HRP-綴合的鏈霉抗生物素蛋白加入到孔中,。再次沖洗板孔，向孔中加入TMB底物溶液,，其與所結(jié)合的Galectin-3的量成比例地顯色,。 終止液將溶液顏色從藍(lán)色變?yōu)辄S色,，并且在450nm處測量吸光度,。

人半乳糖凝集素3檢測試劑盒組成成分

實(shí)驗(yàn)所需材料（未提供）
1.能夠測量450 nm處吸光度的酶標(biāo)儀,。
2.提供2μl至1 ml體積的精密移液管,。
3.可調(diào)1-25毫升移液器用于試劑制備。
4．100毫升和1升刻度量筒,。
5. 吸水紙,。
6. 蒸餾水或去離子水。
7.雙對數(shù)做圖紙或計(jì)算機(jī)和軟件進(jìn)行ELISA數(shù)據(jù)分析,。
8.準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品或樣品稀釋液的管子,。

試劑盒檢測步驟
1、使用前將人半乳糖凝集素3ELISA檢測試劑盒和樣品置于室溫（18 - 25oC）,。建議所有標(biāo)準(zhǔn)和樣品至少重復(fù)一次,。
2、根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)標(biāo)記可拆卸的8孔條,。
3,、分別加入樣品和每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品100μl（參見試劑制備步驟3）到適當(dāng)?shù)陌蹇字小Ｉw上蓋子,，室溫溫和振蕩孵育2.5小時(shí)
4,、棄去溶液，用1X洗滌液洗滌4次,。使用多通道移液器或自動(dòng)洗板機(jī)洗板,，每孔加入洗滌緩沖液（300μl）。每個(gè)步驟中去除液體對于良好的性能是至關(guān)重要的,。洗完后,，通過吸取或傾析清除任何剩余的洗滌緩沖液。倒置板并用干凈的吸水紙吸干印跡,。
5,、每孔加入100μl1X制備的生物素化抗體（試劑制備步驟6）。在室溫下溫和振蕩孵育1小時(shí),。
6,、棄去溶液。重復(fù)洗滌,，如步驟4,。
7、加入100μl制備的鏈霉親和素溶液（見試劑制備步驟7）,。在室溫下溫和搖動(dòng)孵育45分鐘,。
8、棄去溶液,。 重復(fù)洗滌,，如步驟4。
9、向每個(gè)孔中加入100μlTMB一步底物試劑（項(xiàng)目H）,。在室溫下在黑暗中輕輕振蕩孵育30分鐘,。
10、向每個(gè)孔中加入50μl終止液（項(xiàng)目I）,。 立即讀取450 nm處吸光度值,。

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